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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 割胶回收后的DNA片段如何做克隆？
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uuu555000

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[交流] 割胶回收后的DNA片段如何做克隆？

割胶回收后的DNA片段如何做克隆？
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1楼 2012-07-26 19:15:38
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云破月来xxz

银虫 (小有名气)
★ ★ ★
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uuu555000: 金币+2 2012-07-29 12:04:17
一般用普通Taq酶3‘末端会加A，可以T载体连接，效率比较高，可以做一个亚克隆，然后提质粒获得克隆。
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13楼2012-07-29 12:01:25
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yuzhiming

捐助贵宾 (知名作家)
★ ★ ★
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amisking: 金币+1, 鼓励发帖交流问题。 2012-07-26 21:57:38
uuu555000: 金币+1 2012-07-27 18:27:21
直接酶切。连接到终载体中

或者直接连入中间过渡载体。测序验证后在做后续酶切连接。
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2楼2012-07-26 19:39:18
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liuyu_sdili

木虫 (正式写手)
★ ★
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uuu555000: 金币+1 2012-07-27 18:27:18
如果两端有合适的位点，可以酶切载体后连接克隆。
如果对于序列信息一无所知，可以利用taq酶在两端加A，克隆到T载体中，做进一步分析~~~
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3楼2012-07-26 20:15:25
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mlanqiang

木虫之王 (文学泰斗)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
直接切酶应该可以吧。
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4楼2012-07-26 20:52:00
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