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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 割胶回收后的DNA片段如何做克隆？
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uuu555000

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[交流] 割胶回收后的DNA片段如何做克隆？

割胶回收后的DNA片段如何做克隆？
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1楼 2012-07-26 19:15:38
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trizol11

木虫 (正式写手)
★
uuu555000: 金币+1 2012-07-29 15:14:36
引用回帖:
14楼: Originally posted by trizol11 at 2012-07-29 12:20:01
我觉得PCR产物回收后，直接转化，加培养液，涂板就可以了，酶切啥的都是浮云

对了，在转化前做个连接，
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15楼2012-07-29 12:21:45
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yuzhiming

捐助贵宾 (知名作家)
★ ★ ★
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amisking: 金币+1, 鼓励发帖交流问题。 2012-07-26 21:57:38
uuu555000: 金币+1 2012-07-27 18:27:21
直接酶切。连接到终载体中

或者直接连入中间过渡载体。测序验证后在做后续酶切连接。
赞一下 回复此楼
2楼2012-07-26 19:39:18
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liuyu_sdili

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
uuu555000: 金币+1 2012-07-27 18:27:18
如果两端有合适的位点，可以酶切载体后连接克隆。
如果对于序列信息一无所知，可以利用taq酶在两端加A，克隆到T载体中，做进一步分析~~~
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2012-07-26 20:15:25
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mlanqiang

木虫之王 (文学泰斗)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
直接切酶应该可以吧。
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4楼2012-07-26 20:52:00
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