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丹604859039

银虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白质电泳跑不出条带怎么办？？？？急急急！！！！已有1人参与

我分别用咪唑和磷酸盐缓冲溶液洗脱吸附在材料上的蛋白质。用标准品做实验时，洗脱效率都是50%。我现在碰到一个问题，就是洗脱完实际样品后，去跑电泳，咪唑洗脱的能跑出条带，磷酸盐缓冲液洗脱的跑不出条带，并且洗脱下来的溶液震荡也不起沫，可能是蛋白浓度太低。各位大神有什么好的办法帮我解决这个问题吗，怎么样才能跑出条带呢？我比较想让磷酸盐缓冲液洗下来的跑出条带。谢谢谢谢……！！！！！！
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1楼2014-05-06 20:47:41
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chengjg

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

就是低温冷冻干燥，你的蛋白样品洗脱液先放入透析袋脱盐，然后放在小点的容器中-20℃预冻然后冷冻干燥剂脱水就得到蛋白质固体了，然后再用你的跑电泳的样品处理液什么的溶解就可以了。
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4楼2014-05-13 08:27:25
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chengjg

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
先用考马斯亮蓝检测一下蛋白有没有啊，有的话可以冻干浓缩一下。然后在用缓冲液把蛋白溶解跑电泳。
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丹604859039
2楼2014-05-07 16:13:05
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丹604859039

银虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by chengjg at 2014-05-07 16:13:05
先用考马斯亮蓝检测一下蛋白有没有啊，有的话可以冻干浓缩一下。然后在用缓冲液把蛋白溶解跑电泳。

我测试过，有蛋白，具体怎么冻干浓缩啊，具体条件是什么啊？谢谢啦！

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3楼2014-05-08 09:22:08
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丹604859039

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by chengjg at 2014-05-13 08:27:25
就是低温冷冻干燥，你的蛋白样品洗脱液先放入透析袋脱盐，然后放在小点的容器中-20℃预冻然后冷冻干燥剂脱水就得到蛋白质固体了，然后再用你的跑电泳的样品处理液什么的溶解就可以了。

谢谢啦，我试试！！

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5楼2014-05-13 12:15:21
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