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ljj0609

金虫 (小有名气)

[求助] SDS蛋白电泳分离胶不凝

10毫升的胶,3.3水,4Acr,2.5tris,0.1SDS,0.1过硫酸铵,0.01TEMED。配方有问题吗?有什么注意事项吗?
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008xxy

铁虫 (初入文坛)

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ljj0609: 金币+1, 有帮助 2013-05-16 09:40:19
少加了某样东西,或者你加的TEMED后没混匀沾到管壁上了。要不就是APS过期,但一般过期不会导致不凝,最多就是凝的慢。
2楼2013-05-16 03:58:48
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

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感谢参与,应助指数 +1
ljj0609: 金币+1, 有帮助 2013-05-16 09:40:30
可能是过硫酸铵过期了。过硫酸铵固体容易吸水,反应成硫酸铵和H2O2,H2O2→H2O+O2。
如果确定过硫酸铵和TEMED没问题的话,还有可能是丙烯酰胺溶液没配对。如果Tris缓冲液的pH也会影响凝胶速度。有一次实验室有人忘记调tris的pH,分离胶需要很长时间才能凝,当然分离效果也不行。
3楼2013-05-16 07:17:46
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lcat

木虫 (小有名气)

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ljj0609: 金币+1 2013-05-16 09:40:42
除了APS过期、pH不对,配方里怎么没写甲叉?
4楼2013-05-16 08:43:14
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ljj0609

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by lcat at 2013-05-16 08:43:14
除了APS过期、pH不对,配方里怎么没写甲叉?

甲叉和丙烯酰胺混一起了
5楼2013-05-16 09:47:11
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512053062

铜虫 (小有名气)

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ljj0609: 金币+1 2013-05-17 14:35:27
APS和TEMED顺序不能错,另外APS最好现用现配。
6楼2013-05-16 12:57:36
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416114799

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

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一般都是APS过期,重买一个试试。。TEMED如果够臭就没问题
做人做事要低调,默默践行心中的梦想.
7楼2013-05-16 21:28:48
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aqi96

至尊木虫 (著名写手)

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ljj0609: 金币+1 2013-05-17 14:35:21
make sure you used fresh APS with right concentration.
做最好的自己
8楼2013-05-17 05:03:35
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解思雨

铜虫 (初入文坛)

所有液体没混匀
9楼2014-03-27 09:57:00
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若溪

金虫 (正式写手)

又没哟考虑你用的tris-HCL的PH值得问题呢,我们做分离胶PH是6.8
没有比脚更长的路,没有比人更高的山
10楼2014-03-27 11:36:25
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