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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » SDS蛋白电泳分离胶不凝
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ljj0609

金虫 (小有名气)

[求助] SDS蛋白电泳分离胶不凝

10毫升的胶，3.3水，4Acr，2.5tris，0.1SDS，0.1过硫酸铵，0.01TEMED。配方有问题吗？有什么注意事项吗？
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1楼 2013-05-15 16:47:45
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008xxy

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
ljj0609: 金币+1, ★有帮助 2013-05-16 09:40:19
少加了某样东西，或者你加的TEMED后没混匀沾到管壁上了。要不就是APS过期，但一般过期不会导致不凝，最多就是凝的慢。
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2楼2013-05-16 03:58:48
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
ljj0609: 金币+1, ★有帮助 2013-05-16 09:40:30
可能是过硫酸铵过期了。过硫酸铵固体容易吸水，反应成硫酸铵和H2O2，H2O2→H2O+O2。
如果确定过硫酸铵和TEMED没问题的话，还有可能是丙烯酰胺溶液没配对。如果Tris缓冲液的pH也会影响凝胶速度。有一次实验室有人忘记调tris的pH，分离胶需要很长时间才能凝，当然分离效果也不行。
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3楼2013-05-16 07:17:46
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lcat

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
ljj0609: 金币+1 2013-05-16 09:40:42
除了APS过期、pH不对，配方里怎么没写甲叉？
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4楼2013-05-16 08:43:14
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ljj0609

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by lcat at 2013-05-16 08:43:14
除了APS过期、pH不对，配方里怎么没写甲叉？

甲叉和丙烯酰胺混一起了
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5楼2013-05-16 09:47:11
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512053062

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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ljj0609: 金币+1 2013-05-17 14:35:27
APS和TEMED顺序不能错，另外APS最好现用现配。
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6楼2013-05-16 12:57:36
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416114799

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

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一般都是APS过期，重买一个试试。。TEMED如果够臭就没问题
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做人做事要低调,默默践行心中的梦想.
7楼2013-05-16 21:28:48
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aqi96

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
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ljj0609: 金币+1 2013-05-17 14:35:21
make sure you used fresh APS with right concentration.
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做最好的自己
8楼2013-05-17 05:03:35
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解思雨

铜虫 (初入文坛)
所有液体没混匀
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9楼2014-03-27 09:57:00
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若溪

金虫 (正式写手)
又没哟考虑你用的tris-HCL的PH值得问题呢，我们做分离胶PH是6.8
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没有比脚更长的路，没有比人更高的山
10楼2014-03-27 11:36:25
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