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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 再一次求助SDS蛋白胶问题
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孟王氏

金虫 (小有名气)

[求助] 再一次求助SDS蛋白胶问题

之前因为试剂的问题所以胶一直没跑好，这次又不知道哪里出问题了，老是拖带特别严重，具体如图

从左到右依次是上清沉淀上清沉淀上清沉淀上清marker 沉淀沉淀
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1楼 2011-11-21 17:06:21
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凡子1985

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
amisking(金币+1): 鼓励积极应助！ 2011-11-21 18:35:59
做实验太马虎 看这个胶的状态就能看到你做实验毛躁 好好配一次胶  各个细节都注意了
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2楼2011-11-21 17:49:59
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孟王氏

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 凡子1985 at 2011-11-21 17:49:59:
做实验太马虎 看这个胶的状态就能看到你做实验毛躁 好好配一次胶  各个细节都注意了

哦，是不是沉淀处理有问题呢？上清没什么问题，沉淀老是会这样子
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3楼2011-11-21 18:11:59
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卖烧饼的

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
西瓜(金币+1): 鼓励分享经验，欢迎常来啊！ 2011-11-23 17:53:20
少加点样试试  我们原来也不大清楚 少加点样 两条带就分开了
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4楼2011-11-21 18:42:03
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凡子1985

银虫 (小有名气)
★
西瓜(金币+1): 确实 2011-11-23 17:53:33
引用回帖:
3楼: Originally posted by 孟王氏 at 2011-11-21 18:11:59:
哦，是不是沉淀处理有问题呢？上清没什么问题，沉淀老是会这样子

如果是沉淀 煮完记得离心 加入上清
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5楼2011-11-21 18:42:20
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

有沉淀或是蛋白处理不恰当！
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jiayoubashaonian
6楼2011-11-21 19:01:24
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孟王氏

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by blackrose8089 at 2011-11-21 19:01:24:
有沉淀或是蛋白处理不恰当！

那沉淀怎么处理呢？我们都是加了loading  buffer（成分是2ml巯基乙醇，）之后直接煮然后离心的啊
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7楼2011-11-21 19:15:22
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
西瓜(金币+2): Good！ 2011-11-23 17:54:19
引用回帖:
7楼: Originally posted by 孟王氏 at 2011-11-21 19:15:22:
那沉淀怎么处理呢？我们都是加了loading  buffer（成分是2ml巯基乙醇，）之后直接煮然后离心的啊

离心速度大些，时间长点，吸的时候看着枪头别粘到沉淀！
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jiayoubashaonian
8楼2011-11-21 19:17:53
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beibei9535

荣誉版主 (职业作家)

晕晕小版主~ 姑娘你好！

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

用的百分之几的分离胶？
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最好的年龄是，那一天，终于知道并且坚信自己有多好，不是虚张，不是夸浮，不是众人捧，是内心明明澈澈知道：是的，我就是这么好。
9楼2011-11-21 19:54:21
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dhy481

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
wanhscn(金币+2): 鼓励交流 2011-11-22 10:47:34
我之前也出现过你这样的情况，确实是因为沉淀样品煮了之后直接上样导致的，然后我又吹打了一番，再次煮了10分钟，就好多了
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10楼2011-11-21 21:08:50
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