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！芝麻开门

新虫 (初入文坛)

[交流] PET28载体的T7启动子是T7还是T7lac启动子？表达时需不需要IPTG诱导？ 已有5人参与

哪位大神可以解答一下
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1楼 2014-05-05 12:31:05
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xiaoamuchong

专家顾问 (职业作家)

科研工作者
★ ★
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laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助！ 2014-05-07 23:23:27
是T7启动子。pET-28质粒带有T7启动子和编码阻遏蛋白lacI的基因，在插入目的基因后，lacI是失活的。表达时是需要IPTG诱导的。
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曾经有人问我为什么要学微生物，我只是想离生命的本质更近一点。
2楼2014-05-07 13:11:38
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吹着泡泡的夏

金虫 (小有名气)
在做T克隆？
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走着走着就长大了
3楼2014-05-07 16:38:59
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602059625

金虫 (知名作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
为了降低basal expression，pET28载体上T7启动子的下游还加了一段lac operator序列
pET载体表达需要有IPTG诱导，以解除对基因组上lacUV5启动子的阻遏，以及pET载体上lac operator的阻遏
PET28载体的T7启动子是T7还是T7lac启动子？表达时需不需要IPTG诱导？
PET28载体的T7启动子是T7还是T7lac启动子？表达时需不需要IPTG诱导？-1
PET28载体的T7启动子是T7还是T7lac启动子？表达时需不需要IPTG诱导？-2
来源：pET system manual
         http://www.emdmillipore.com/life ... s1O77QAAAEhPqsLdcab
基因组上的lacUV5启动子控制T7 RNA polymerase gene的表达
PET28载体的T7启动子是T7还是T7lac启动子？表达时需不需要IPTG诱导？-3
来源：http://www.emdmillipore.com/showBrochure/201001.195.ProNet.pdf
另外pET28载体上还有一个组成型表达的lacI基因，其作用是增加lacI阻遏物的表达量，因为pET28载体以多拷贝存在，仅靠基因组上的lacI基因无法产生足够多的lacI阻遏物
而不是通过插入失活来筛选目的基因
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[url=http://ip.WoTuLa.com][img]http://i.WoTuLa.com/note.png?name=填写姓名&say=这里填写您想说的内容。[/img][/url]
4楼2014-05-07 23:09:56
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！芝麻开门

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 602059625 at 2014-05-07 23:09:56
为了降低basal expression，pET28载体上T7启动子的下游还加了一段lac operator序列
pET载体表达需要有IPTG诱导，以解除对基因组上lacUV5启动子的阻遏，以及pET载体上lac operator的阻遏



来源：pET system m ...

受教了，谢谢
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5楼2014-05-11 20:26:33
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xissy

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by xiaoamuchong at 2014-05-07 13:11:38
是T7启动子。pET-28质粒带有T7启动子和编码阻遏蛋白lacI的基因，在插入目的基因后，lacI是失活的。表达时是需要IPTG诱导的。

插入目的基因后，lacI没有失活！！！
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6楼2014-10-19 15:53:47
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smilesss

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by 602059625 at 2014-05-07 23:09:56
为了降低basal expression，pET28载体上T7启动子的下游还加了一段lac operator序列
pET载体表达需要有IPTG诱导，以解除对基因组上lacUV5启动子的阻遏，以及pET载体上lac operator的阻遏



来源：pET system m ...

终于把IPTG诱导的全部机理联系起来，谢谢！请问基因组上的lacUV5启动子控制T7 RNA polymerase gene的表达引用自哪一篇文章，原链接打不开
赞一下 回复此楼
恶意dyer又热又往往往往因为
7楼2016-01-18 10:02:41
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