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happywyh

铁虫 (小有名气)

[交流] pET20b是否含有lac operator序列

问题如题目
在图谱中没有查到pET20b（+）含有lac operator序列，但是师兄师姐说不可能，一定有的，说pET系列一定会含有lac operator，求解答~~
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happywyh

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1楼 2012-03-28 21:20:23
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to-be

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
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happywyh: 金币+3 2012-03-29 14:35:39
pET蛋白表达系列一般都是T7lac启动子，图谱中不是什么细节都有的，可能没有提及一些基本信息。
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2楼2012-03-29 01:11:08
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susizheng

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
happywyh: 金币+2 2012-03-29 14:35:47
PET系列载体都是用IPTG诱导的，应该都有LacO的。
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3楼2012-03-29 09:26:25
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wanghuiyanyx

金虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
建议楼主仔细阅读下pET手册，上面有详细讲解。pET20b载体序列上虽然没有lac operator，但是在BL21（DE3）宿主菌染色体上整合有这个元件，所以pET20b还是可以通过IPTG诱导表达蛋白的，只是也有人说这个载体的蛋白表达水平并不是很高。
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4楼2012-03-29 18:57:32
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happywyh

铁虫 (小有名气)
送鲜花一朵
pET手册太长了~没有耐心读完~
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5楼2012-03-30 10:45:52
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indica

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可以确定pET20b没有lac operator, 即无AATTGTGAGCGGATAACAATT序列。所以推荐你不要用这个载体。会有过多的漏表达，不利于蛋白表达。

pET载体有两类：大多数是含有T7/lacO的，也有少数是只含有T7的。
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6楼2012-09-02 17:01:42
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