| 查看: 3103 | 回复: 8 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
同源重组阳性单菌落问题 已有2人参与
|
||
最近在做同源重组， 想把一个荧光蛋白的基因整合到大肠杆菌基因组的某个地方里， 用的是 red recombinase. 好不容易筛选到几个阳性菌落后做菌落PCR， 引物选用construct上下游的各一段基因，可是每个单菌落pcr出来都有两条带， 一条大小2kb，恰好是整合进去的结果，一条是300bp（类似WT的结果）， 是没整合进去的意思。 我以为是单菌落不纯， 于是用验证过的阳性单菌落再涂reduction plate， 再挑单菌落pcr得出来的结果还是混合2kb条带和300bp条带的结果，为啥一个单菌落里会有两种基因型呢？？？？各位大侠有什么解释和办法么，，，好不容易有一个结果~~~(>_< ~~~ |
回复此楼» 猜你喜欢
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有201人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
化工申博
已经有3人回复
-
申博自荐
已经有2人回复
-
广西民族大学化学化工学院化学工程与技术学硕，材料化工专硕调剂名额充足！
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- TA克隆老是失败，求高人解惑
已经有17人回复
- RED重组敲除基因，PCR验证时既有目的基因条带也有打靶片段条带
已经有18人回复
- 蔗糖致死双交换筛选
已经有15人回复
- red系统敲除用的感受态能放多久？同源臂太长会不会反而不好敲？
已经有7人回复
- PKD46电转进大肠并涂布，然后37度倒置培养可以吗
已经有9人回复
- 肠杆菌表达蛋白出问题
已经有6人回复
- 双质粒共同转入酵母细胞
已经有6人回复
- 质粒测序后发现有重叠现象
已经有13人回复
- 阳性克隆的筛选问题
已经有15人回复
- 原核表达载体构建，测序不成功
已经有20人回复
- 菌液PCR结果不正确
已经有4人回复
- 大肠杆菌基因重组时PKD46高温怎么都消除不了
已经有25人回复
- 大肠杆菌DH5a作感受态，PMD-19T载体连接重组的问题
已经有3人回复
- 酵母重组子筛选引物问题
已经有6人回复
- 【资料】分子生物学常见问题解答
已经有30人回复
- 啤酒酵母质粒转化求助
已经有7人回复
- 【求助/交流】大肠杆菌菌液，如何再扩增？
已经有13人回复
- 【求助/交流】关于电转酵母X33的问题
已经有11人回复
- 【求助/交流】关于基因敲除
已经有21人回复
- 【求助/交流】求助酿酒酵母转化
已经有3人回复
- 【求助/交流】请教关于大肠杆菌lamda RED重组问题
已经有23人回复
zhaodahe
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 220 (大学生)
- 金币: 1796.6
- 红花: 7
- 帖子: 461
- 在线: 378.5小时
- 虫号: 552612
- 注册: 2008-04-30
- 性别: GG
- 专业: 微生物遗传学
4楼2014-04-30 21:03:37
2楼2014-04-30 05:32:16
必须看了呀。基本就是按着这个做的。3楼2014-04-30 18:52:59
5楼2014-04-30 21:36:32
10