24小时热门版块排行榜

返回列表

liondolphin

银虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 453
帖子: 12
在线: 6.9小时
虫号: 2001198
注册: 2012-09-14
专业: 系统生物学

[求助] red系统敲除用的感受态能放多久？同源臂太长会不会反而不好敲？已有2人参与

red重组系统中含有pkd46质粒的菌在加阿拉伯糖诱导后做成电转感受态，它在转线性片段之前能在-80冰箱里放多久呀？我敲的是大肠DH5a，同源臂搞了个两边各800bp的，结果转了2次，长了好多，结果就一个可能是我要的，是不是同源臂太长了的缘故？

回复此楼

» 猜你喜欢

解密度鲁特韦——新一代HIV整合酶抑制剂的化学、药理与产业化图景已经有0人回复
左炔诺孕酮从沃氏氧化物到炔基化反应的工艺迭代与靶点解析已经有0人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有154人回复
“关闭瘙痒信号”的多肽地非法林醋酸盐全解析已经有1人回复
Tosylate-DPA-714介导¹⁸F-DPA-714 PET成像的前沿进展已经有0人回复
I-BRD9: BRD9溴结构域化学探针，BET选择性>700倍已经有0人回复
莫那利珠单抗阻断NKG2A/HLA-E抑制通路 | Biochempartner 已经有0人回复
GSPT1口服分子胶降解剂MRT-2359 | Biochempartner 已经有0人回复
碳青霉烯类抗生素为何需联用西司他丁钠？ | Biochempartner 已经有0人回复
源自蕨类植物的抗炎美白活性分子去甲氧基荚果蕨素 | Biochempartner 已经有0人回复
肠道里的"代谢开关"：Fexaramine用肠道限制性重新定义 FXR 激动剂已经有0人回复

1楼 2014-01-03 17:22:32

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

朱多龙

木虫 (小有名气)

应助: 40 (小学生)
金币: 4389.8
红花: 10
帖子: 221
在线: 389.2小时
虫号: 2055828
注册: 2012-10-12
性别: GG
专业: 微生物生理与生物化学

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
liondolphin: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2014-01-05 11:04:59
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-01-05 15:17:25

一般存到负80是有什么问题的，关键你要是诱导表达那三个功能蛋白后再存可能就会有影响，最好还是诱导完做好感受态直接使用。还有就是同源臂的问题，在大肠里每端200bp足够了。太多了有时候会有其它位点重组的可能。

赞一下

回复此楼

2楼2014-01-03 17:37:06

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

liondolphin

银虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 453
帖子: 12
在线: 6.9小时
虫号: 2001198
注册: 2012-09-14
专业: 系统生物学

引用回帖:

2楼: Originally posted by 朱多龙 at 2014-01-03 17:37:06
一般存到负80是有什么问题的，关键你要是诱导表达那三个功能蛋白后再存可能就会有影响，最好还是诱导完做好感受态直接使用。还有就是同源臂的问题，在大肠里每端200bp足够了。太多了有时候会有其它位点重组的可能。

原来如此，看来不能偷懒啊，原本因为dh5a和bl21(de3)都要敲，所以按照bl21弄了个长的同源臂，结果就弄不好了

[ 发自小木虫客户端 ]

赞一下

回复此楼

3楼2014-01-04 18:20:23

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖