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无敌小莫

铜虫 (小有名气)

[求助] 求助 连接后平板长出了23个菌落 已有2人参与

但是做单酶切验证,琼脂糖凝胶电泳条带却发现和原来的PET32a质粒单酶切后条带一样大小,这不科学啊!PS:宿主菌本身为卡纳抗性,而PET32a质粒为载体质粒,本身带有氨苄抗性,在双抗平板和液体培养基中长的都是超级的好,不应该是没有连接成功啊。。。
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zep616745243

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
无敌小莫(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-04-28 19:50:49
强烈建议再做个双酶切,放到一张图上对比一下,感觉PET32a这个载体比较怪
只有不断地失败才会成功
2楼2014-04-28 13:11:06
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无敌小莫

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zep616745243 at 2014-04-28 13:11:06
强烈建议再做个双酶切,放到一张图上对比一下,感觉PET32a这个载体比较怪

是挺怪的。我都卡在这里三个月了...
3楼2014-04-28 19:48:10
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zep616745243

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 无敌小莫 at 2014-04-28 19:48:10
是挺怪的。我都卡在这里三个月了......

能否上个图瞧瞧,看看你的pet32a空质粒条带怎么样
只有不断地失败才会成功
4楼2014-04-28 20:00:33
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meng_xu

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
对照平板长的怎么样呢?连接的板子菌落数不完全说明问题啊
5楼2014-04-29 08:06:48
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