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诱导表达一个小分子蛋白,方法和诱导条件都是按文献中给的,一直诱导不出来该怎么办
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白色帝企鹅
新虫
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]
诱导表达一个小分子蛋白,方法和诱导条件都是按文献中给的,一直诱导不出来该怎么办
蛋白很小,只有7K多,IPTG的量0.1mM、1mM都试过,诱导的时间文献中说是3——6h,也都试过了,温度是按照文献上给的37摄氏度,用20%的PAGE胶跑的,一直诱导不出来是怎么回事?问题到底出在哪里?文献中能做出来,我为啥就诱导不出来呢?
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1楼
2014-04-26 19:47:11
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lpzl
木虫
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性别: GG
专业: 生物化学
用的是哪个载体?确定连上去了么?
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Start_everyday_with_a_new_hope,_leave_bad_memories...
2楼
2014-04-28 11:29:32
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虫号: 2810447
注册: 2013-11-18
性别: GG
专业: 生物大分子结构与功能
你好,我最近也在做诱导蛋白的实验,有诱导剂,诱导时间,培养温度,但是最重要的还是你的菌,你的菌应该也是转化后的,看你的转化怎么样了确定你的感受态,你的重组质粒。以及你的转化没有问题,做个对照吧。不要慌,实验慢慢来,多思考,不要一直做,思考分析最重要
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Sodoyouwanttotakealeapoffaith…orbecomeanoldman,filledwithregret…waitingtodiealone?
3楼
2014-04-29 10:30:15
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