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白色帝企鹅

新虫 (初入文坛)

[求助] 诱导表达一个小分子蛋白,方法和诱导条件都是按文献中给的,一直诱导不出来该怎么办

蛋白很小,只有7K多,IPTG的量0.1mM、1mM都试过,诱导的时间文献中说是3——6h,也都试过了,温度是按照文献上给的37摄氏度,用20%的PAGE胶跑的,一直诱导不出来是怎么回事?问题到底出在哪里?文献中能做出来,我为啥就诱导不出来呢?
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lpzl

木虫 (正式写手)

用的是哪个载体?确定连上去了么?
Start_everyday_with_a_new_hope,_leave_bad_memories...
2楼2014-04-28 11:29:32
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夏至1990

金虫 (小有名气)

小小虫

你好,我最近也在做诱导蛋白的实验,有诱导剂,诱导时间,培养温度,但是最重要的还是你的菌,你的菌应该也是转化后的,看你的转化怎么样了确定你的感受态,你的重组质粒。以及你的转化没有问题,做个对照吧。不要慌,实验慢慢来,多思考,不要一直做,思考分析最重要
Sodoyouwanttotakealeapoffaith…orbecomeanoldman,filledwithregret…waitingtodiealone?
3楼2014-04-29 10:30:15
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