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wm阳光新虫 (正式写手)
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[求助]
提取片段太短 已有1人参与
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现在做黄水中DNA的提取，课提取出来的片段就在700-800bp，不能用于后续DGGE，请教在提取过程中怎么防止DNA片段的断裂 DNA提取方法： 黄水预处理：40ml黄水（6000r/min离心10min)------沉淀用TE缓冲液洗涤------向沉淀中加5mlTE 1、取0.8ml预处理黄水加500ulDNA抽提液、40ul （50mg/ml）溶菌酶、10ul(20ug/ml）蛋白酶K，37度水浴30min 2、加200ul 20%的SDS，65度水浴2h，每隔15min，颠倒摇匀 3、6000r/min l离心10min收集上清 4、沉淀加入500ul抽提液和200ulSDS,65度水浴10min 5、6000r/min离心10min,收集上清，合并上清 6、加入等体积的酚：氯仿：异戊醇（25:24:1）摇匀，12000r/min离心10min,收集上清 7、向上清中加入酚：氯仿：异戊醇再抽提一次 8、加入0.6倍体积无水乙醇，4度沉淀1h 9、12000r/min离心10min,收集沉淀 10、遇冷的70%的乙醇洗涤沉淀，自然干燥 11、沉淀加50uiTE |
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z441229642 
铜虫 (小有名气)
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2楼2014-05-13 15:51:25
