版块导航: 正在加载中...

客户端APP下载

登录注册

应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

水墨蓝

铁虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 219.3
散金: 2
红花: 1
帖子: 76
在线: 29.6小时
虫号: 1283855
注册: 2011-05-03
专业: 微生物生理与生物化学

[交流] 空质粒双酶切出现非常相近的两条带？转化长满板？

最近在做原核表达的构建，出现很多以前没见过的情况，各位虫友请帮忙想想什么原因：
1. 空载体约5400 bp，但提取后跑胶显示比15000 bp还要大，单酶切和双酶切后大小和载体实际大小相差不多，这是其一。
2 单酶切和双酶切后均会出现2条非常相近的条带，载体测过序没有问题，而且所选的酶切位点是载体上单一的
3.双酶切连接转化后涂板，整板长满了菌就像抗性失效一样，后来我涂了不带抗性的菌证明平板抗性没有问题

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

pet32a双酶切之后，电泳条带找不到已经有10人回复
空质粒可以转化如目的菌中，加入目的片段后怎么也转化不进去已经有10人回复
关于测序的问题-双酶切和PCR验证均是对的但是测序后有重叠现象已经有8人回复
求去掉环状质粒中酶切位点和切后的质粒连接问题？已经有7人回复
转化后细菌提质粒，PCR条带很诡异已经有14人回复
纠结的分子实验，双酶切连不上，求助已经有14人回复
求高手帮助：EcoR I 和Nde I双酶切pET28a（+）的纯化问题已经有10人回复
质粒酶切拖尾，附图。已经有3人回复
求助：菌落PCR条带弱且拖尾是怎么回事啊？已经有18人回复
pET28a双酶切后连接目的基因，什么也不长。。。已经有23人回复
双酶切后切胶回收已经有34人回复
空质粒双酶切后大小不对，纠结！已经有11人回复
质粒提取后出现两条亮度相同的带，谁帮我看一下。。。。。。。已经有6人回复
神奇的质粒提取，花儿一样神奇的单酶切跑胶！已经有34人回复
做酶切连接后转化再提质粒，质粒明显变小，Why??? 已经有24人回复
酶切质粒时，怎样鉴定质粒是否被切开了啊？已经有6人回复
【求助/交流】连接产物转化后菌落PCR正确，提取的质粒却比空质粒还小？已经有4人回复

1楼2014-04-17 12:48:17

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

喜子enjoy

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 1
帖子: 2
在线: 12分钟
虫号: 3144090
注册: 2014-04-17

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

你可以问问诺禾致源的人，他们都是很专业的

15楼2014-04-17 17:06:32

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

相关版块跳转我要订阅楼主水墨蓝的主题更新