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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » 蛋白复性后浓度降低了，不知是什么原因
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ljj0720

银虫 (正式写手)

[求助] 蛋白复性后浓度降低了，不知是什么原因 已有1人参与

今天蛋白复性终于结束了，但是出现了一些问题
之前用尿素将包涵体溶解，过柱子纯化，跑了PGAE，看到目的带很浓。然后逐步降低尿素浓度来复性，6M尿素（24h）----4M尿素（12h）----2M尿素（12h）----0.5M尿素（12h）--------PBS（12h）.
复性前体积是3.5ML，复性完后体积，就只有1.2ML左右了，复性前浓度是400ug/ml，复性完后是14ug/ml，
而且在复性过程中也没有沉淀产生。这是怎么搞的啊，复性过程中该注意什么地方啊？做之前是查好资料的，应该注意的地方也觉得是注意到了，还有其他一些情况吗？求高手解答一下！
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1楼 2014-04-13 21:34:45
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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ljj0720: 金币+10, ★有帮助 2014-04-14 07:35:10
可以怀疑透析膜没有扎紧，或者细微破损吗？

照理说体积应该会增加的，因为你是从高盐到低盐。
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行至水穷处，坐看云起时
2楼2014-04-13 21:52:43
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ljj0720

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by pennchem at 2014-04-13 21:52:43
可以怀疑透析膜没有扎紧，或者细微破损吗？

照理说体积应该会增加的，因为你是从高盐到低盐。

恩  如果现在所有其他的都排除，可能就是透析袋的问题了，谢谢您
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3楼2014-04-14 07:35:02
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