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ljj0720

银虫 (正式写手)

[求助] 蛋白复性后浓度降低了,不知是什么原因 已有1人参与

今天蛋白复性终于结束了,但是出现了一些问题
之前用尿素将包涵体溶解,过柱子纯化,跑了PGAE,看到目的带很浓。然后逐步降低尿素浓度来复性,6M尿素(24h)----4M尿素(12h)----2M尿素(12h)----0.5M尿素(12h)--------PBS(12h).
复性前体积是3.5ML,复性完后体积,就只有1.2ML左右了,复性前浓度是400ug/ml,复性完后是14ug/ml,
而且在复性过程中也没有沉淀产生。这是怎么搞的啊,复性过程中该注意什么地方啊?做之前是查好资料的,应该注意的地方也觉得是注意到了,还有其他一些情况吗?求高手解答一下!
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
ljj0720: 金币+10, 有帮助 2014-04-14 07:35:10
可以怀疑透析膜没有扎紧,或者细微破损吗?

照理说体积应该会增加的,因为你是从高盐到低盐。
行至水穷处,坐看云起时
2楼2014-04-13 21:52:43
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ljj0720

银虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by pennchem at 2014-04-13 21:52:43
可以怀疑透析膜没有扎紧,或者细微破损吗?

照理说体积应该会增加的,因为你是从高盐到低盐。

恩  如果现在所有其他的都排除,可能就是透析袋的问题了,谢谢您
3楼2014-04-14 07:35:02
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