应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 8kbp怎么做PCR?
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
111/2返回列表12下一页
查看: 1288  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

致远012

金虫 (初入文坛)

精灵

[求助] 8kbp怎么做PCR? 已有5人参与

如何从人的全基因组PCR得到一段8Kbp左右的目的片段，谢谢各位大神！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
我有一颗勇敢的心。
1楼 2014-04-02 22:34:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
致远012: 金币+1, ★有帮助, 最少分成几个片段呢？ 2014-04-03 09:11:04
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-04-03 12:08:30
用扩长片段的酶LongAMP试试，很多公司都有。
赞一下 回复此楼
hehe
2楼2014-04-03 07:49:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

d00614028

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
致远012: 金币+1, 会不会出现连不上的情况呢? 2014-04-03 09:10:31
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-04-03 12:08:36
也可以1K, 1K的PCR，然后做overlap
赞一下 回复此楼
3楼2014-04-03 08:35:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

致远012

金虫 (初入文坛)

精灵
引用回帖:
2楼: Originally posted by lvbobo823 at 2014-04-03 07:49:10
用扩长片段的酶LongAMP试试，很多公司都有。

一般至少P几次啊？
赞一下 回复此楼
我有一颗勇敢的心。
4楼2014-04-03 09:03:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

致远012

金虫 (初入文坛)

精灵
引用回帖:
3楼: Originally posted by d00614028 at 2014-04-03 08:35:19
也可以1K, 1K的PCR，然后做overlap

会不会出现连不上的情况呢？
赞一下 回复此楼
我有一颗勇敢的心。
5楼2014-04-03 09:04:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

d00614028

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 致远012 at 2014-04-03 09:04:00
会不会出现连不上的情况呢？...

设计引物的时候在相邻引物间设置30bp长的overlap区，这样的话先1K P出来然后做overlap。
赞一下 回复此楼
6楼2014-04-03 09:14:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lihe131

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-04-03 12:08:50
如果可以找到适当的酶切位点的话，可以先将一部分克隆出来，然后以此为载体，再将另外一部分连进去。
赞一下 回复此楼
7楼2014-04-03 09:32:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 致远012 at 2014-04-03 09:03:26
一般至少P几次啊？...

P一次就可以了
回复此楼
hehe
8楼2014-04-03 16:59:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-04-06 16:21:01
clontech的Advantage2 可以做到，一次就OK

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
9楼2014-04-06 14:41:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hufangzhou

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-04-06 16:21:17
引物设计24bp以上，用LA taq（很多公司都有，我一般用Takara的），用两步法跑，一般是先94℃ 退火5min，接着98℃ 10s， 68℃ 8min（1kb每分钟），30cycles，最后72℃延伸10min。我用此方法跑过8k多的，只是模板DNA的质量要求相对高一点，楼主可以试试。
赞一下 回复此楼
10楼2014-04-06 16:06:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 致远012 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 283分材料与化工求调剂 +19 罗KAKA 2026-04-02 19/950 2026-04-02 23:01 by 马儿快快地跑
[考研] 环境科学与工程334分求调剂 +7 王一一依依 2026-03-30 9/450 2026-04-02 21:15 by 1104338198
[考研] 288求调剂 一志愿哈工大 材料与化工 +31 洛神哥哥 2026-03-31 33/1650 2026-04-02 20:00 by tianyyysss
[考研] 311求调剂 +14 蓝月亮亮 2026-03-30 14/700 2026-04-02 12:18 by 1753564080
[考研] 265求调剂11408 +4 刘小鹿lu 2026-03-27 4/200 2026-04-02 11:27 by guyan1000
[考研] 085600，材料与化工321分，求调剂 +13 大馋小子 2026-03-27 13/650 2026-04-02 10:48 by sanrepian
[考研] 一志愿北交大材料工程总分358 +8 cs0106 2026-04-01 9/450 2026-04-02 10:36 by 不吃魚的貓
[考研] 337求调剂 +11 《树》 2026-03-29 11/550 2026-04-02 10:20 by 不吃魚的貓
[考研] 292求调剂 +14 是妍子也是研子 2026-03-30 14/700 2026-04-02 10:17 by sanrepian
[考研] 322求调剂 +5 熹僖XX 2026-03-31 6/300 2026-04-02 10:08 by 求调剂zz
[考研] 08生物与医药专硕初试346找调剂 +6 dianeeee 2026-04-01 7/350 2026-04-02 08:23 by guoweigw
[考研] 材料调剂 +14 一样YWY 2026-04-01 14/700 2026-04-01 21:07 by lijunpoly
[考研] 085601材料工程找调剂 +20 oatmealR 2026-03-29 21/1050 2026-04-01 21:00 by lijunpoly
[考研] 379求调剂 +3 ?苦瓜不苦 2026-04-01 3/150 2026-04-01 20:09 by 暮云清寒
[考研] 0703一志愿南师大334求调剂 +4 seven7yu 2026-03-30 4/200 2026-04-01 16:10 by oooqiao
[考研] 267求调剂 +13 uiybh 2026-03-31 13/650 2026-04-01 10:25 by 探123
[考研] 375求调剂 +7 雨夏整夜 2026-03-29 7/350 2026-03-31 18:52 by xhai2011
[考研] 070300化学354求调剂 +15 101次希望 2026-03-28 15/750 2026-03-31 17:58 by jp9609
[考研] 求调剂 +7 青春裁为三截 2026-03-29 7/350 2026-03-30 13:14 by laoshidan
[考研] 283求调剂 +3 A child 2026-03-28 3/150 2026-03-28 15:41 by ms629
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭