应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 8kbp怎么做PCR?
111/2返回列表12下一页
查看: 1428  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

致远012

金虫 (初入文坛)

精灵

[求助] 8kbp怎么做PCR? 已有5人参与

如何从人的全基因组PCR得到一段8Kbp左右的目的片段，谢谢各位大神！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
我有一颗勇敢的心。
1楼 2014-04-02 22:34:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
致远012: 金币+1, ★有帮助, 最少分成几个片段呢？ 2014-04-03 09:11:04
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-04-03 12:08:30
用扩长片段的酶LongAMP试试，很多公司都有。
赞一下 回复此楼
hehe
2楼2014-04-03 07:49:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

d00614028

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
致远012: 金币+1, 会不会出现连不上的情况呢? 2014-04-03 09:10:31
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-04-03 12:08:36
也可以1K, 1K的PCR，然后做overlap
赞一下 回复此楼
3楼2014-04-03 08:35:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

致远012

金虫 (初入文坛)

精灵
引用回帖:
2楼: Originally posted by lvbobo823 at 2014-04-03 07:49:10
用扩长片段的酶LongAMP试试，很多公司都有。

一般至少P几次啊？
赞一下 回复此楼
我有一颗勇敢的心。
4楼2014-04-03 09:03:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

致远012

金虫 (初入文坛)

精灵
引用回帖:
3楼: Originally posted by d00614028 at 2014-04-03 08:35:19
也可以1K, 1K的PCR，然后做overlap

会不会出现连不上的情况呢？
赞一下 回复此楼
我有一颗勇敢的心。
5楼2014-04-03 09:04:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

d00614028

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 致远012 at 2014-04-03 09:04:00
会不会出现连不上的情况呢？...

设计引物的时候在相邻引物间设置30bp长的overlap区，这样的话先1K P出来然后做overlap。
赞一下 回复此楼
6楼2014-04-03 09:14:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lihe131

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-04-03 12:08:50
如果可以找到适当的酶切位点的话，可以先将一部分克隆出来，然后以此为载体，再将另外一部分连进去。
赞一下 回复此楼
7楼2014-04-03 09:32:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 致远012 at 2014-04-03 09:03:26
一般至少P几次啊？...

P一次就可以了
回复此楼
hehe
8楼2014-04-03 16:59:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-04-06 16:21:01
clontech的Advantage2 可以做到，一次就OK

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
9楼2014-04-06 14:41:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hufangzhou

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-04-06 16:21:17
引物设计24bp以上，用LA taq（很多公司都有，我一般用Takara的），用两步法跑，一般是先94℃ 退火5min，接着98℃ 10s， 68℃ 8min（1kb每分钟），30cycles，最后72℃延伸10min。我用此方法跑过8k多的，只是模板DNA的质量要求相对高一点，楼主可以试试。
赞一下 回复此楼
10楼2014-04-06 16:06:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 致远012 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 EWi2p09MOOv8 2026-08-16 6/300 2026-08-17 14:02 by EYK67XJMj64E
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +33 医学老男孩 2026-08-13 79/3950 2026-08-17 14:00 by GZUZM
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 6GojgJvkDudM 2026-08-16 4/200 2026-08-17 13:49 by EYK67XJMj64E
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +7 wangze12014 2026-08-14 8/400 2026-08-17 12:45 by a441914426
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +12 Ldrop2023 2026-08-13 13/650 2026-08-17 12:33 by gltch
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 i7NFEVbjQMM5 2026-08-16 4/200 2026-08-17 12:10 by 4GBAYCdVQoK3
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 6GojgJvkDudM 2026-08-16 4/200 2026-08-17 11:46 by 4GBAYCdVQoK3
[论文投稿] 岩土工程学报什么时候才能终审完呐 25+3 yeager111 2026-08-10 4/200 2026-08-16 20:42 by tfang
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 6/300 2026-08-16 20:07 by 奶牛小黑
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[精细化工] 招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了，巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 确定了，国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭