应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 8kbp怎么做PCR?
111/2返回列表12下一页
查看: 1426  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

致远012

金虫 (初入文坛)

精灵

[求助] 8kbp怎么做PCR? 已有5人参与

如何从人的全基因组PCR得到一段8Kbp左右的目的片段，谢谢各位大神！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
我有一颗勇敢的心。
1楼 2014-04-02 22:34:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
致远012: 金币+1, ★有帮助, 最少分成几个片段呢？ 2014-04-03 09:11:04
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-04-03 12:08:30
用扩长片段的酶LongAMP试试，很多公司都有。
赞一下 回复此楼
hehe
2楼2014-04-03 07:49:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

d00614028

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
致远012: 金币+1, 会不会出现连不上的情况呢? 2014-04-03 09:10:31
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-04-03 12:08:36
也可以1K, 1K的PCR，然后做overlap
赞一下 回复此楼
3楼2014-04-03 08:35:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

致远012

金虫 (初入文坛)

精灵
引用回帖:
2楼: Originally posted by lvbobo823 at 2014-04-03 07:49:10
用扩长片段的酶LongAMP试试，很多公司都有。

一般至少P几次啊？
赞一下 回复此楼
我有一颗勇敢的心。
4楼2014-04-03 09:03:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

致远012

金虫 (初入文坛)

精灵
引用回帖:
3楼: Originally posted by d00614028 at 2014-04-03 08:35:19
也可以1K, 1K的PCR，然后做overlap

会不会出现连不上的情况呢？
赞一下 回复此楼
我有一颗勇敢的心。
5楼2014-04-03 09:04:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

d00614028

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 致远012 at 2014-04-03 09:04:00
会不会出现连不上的情况呢？...

设计引物的时候在相邻引物间设置30bp长的overlap区，这样的话先1K P出来然后做overlap。
赞一下 回复此楼
6楼2014-04-03 09:14:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lihe131

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-04-03 12:08:50
如果可以找到适当的酶切位点的话，可以先将一部分克隆出来，然后以此为载体，再将另外一部分连进去。
赞一下 回复此楼
7楼2014-04-03 09:32:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 致远012 at 2014-04-03 09:03:26
一般至少P几次啊？...

P一次就可以了
回复此楼
hehe
8楼2014-04-03 16:59:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-04-06 16:21:01
clontech的Advantage2 可以做到，一次就OK

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
9楼2014-04-06 14:41:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hufangzhou

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-04-06 16:21:17
引物设计24bp以上，用LA taq（很多公司都有，我一般用Takara的），用两步法跑，一般是先94℃ 退火5min，接着98℃ 10s， 68℃ 8min（1kb每分钟），30cycles，最后72℃延伸10min。我用此方法跑过8k多的，只是模板DNA的质量要求相对高一点，楼主可以试试。
赞一下 回复此楼
10楼2014-04-06 16:06:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 致远012 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 一作与独作在应聘高校教师时区别大吗 +3 mbygzh 2026-08-08 4/200 2026-08-13 19:31 by 龙-樱
[基金申请] FileCode能看出啥？ +10 要乐观耀哥 2026-08-10 28/1400 2026-08-13 17:51 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 documentary 2026-08-10 16/800 2026-08-13 16:39 by 润生71
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了，巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 好奇怪的filecode +5 布布和一二 2026-08-08 6/300 2026-08-12 16:11 by 云上清扬
[论文投稿] 职称评审，求友友推荐见刊最快的期刊 +4 工厂打螺丝 2026-08-08 4/200 2026-08-12 09:18 by hansi2025
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 10/500 2026-08-12 09:12 by 布布和一二
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊 +8 Tide man 2026-08-10 9/450 2026-08-11 20:39 by beefly
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了，国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 关于代码变化问题，想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] fileCode有新解读？ +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制，评价高的钱多评价低的钱少，但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变，有变的大神么？ +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭