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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » RNA测完整性电泳
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lanlvmaomao

新虫 (初入文坛)

[求助] RNA测完整性电泳 已有5人参与

有个问题，要做荧光定量pcr，先提取了rna，有一部分放在-80，两天后做的琼脂糖电泳，测RNA完整性。看结果，只有两条带，但是亮度差的不多，亮度应该没有1:2.请各位大神解释，是不是RNA降解了。提取RNA后应该怎么保存才能防止降解呢。
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1楼 2014-03-12 21:25:31
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-03-13 08:38:11
样品都是这样的话，不可能都降解所以你再跑一下试试。RNA放-80可以很长时间。如果你暂时不用可以保存在75%酒精中在-20或-80。
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hehe
2楼2014-03-12 21:34:33
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lanlvmaomao

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lvbobo823 at 2014-03-12 21:34:33
样品都是这样的话，不可能都降解所以你再跑一下试试。RNA放-80可以很长时间。如果你暂时不用可以保存在75%酒精中在-20或-80。

哦，是么，我就是提取完了用RNasefree水稀释rna放的-80。保存在75%酒精放-80后，再用的话该怎么消除酒精呢。谢谢你的回复啊
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3楼2014-03-12 22:33:33
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莫祖英

新虫 (初入文坛)
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-04-23 00:04:30
100%的乙醇放-80度可以保存很久，重新使用的话离心，去乙醇，加无RNA酶水溶解就可以了
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4楼2014-04-22 23:14:37
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xygcdmr

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
lanlvmaomao(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-04-23 23:43:44
RNA如果降解了，最下边的条带会非常亮，真核生物就是5.8S那条带，-80可以长期保存的。
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5楼2014-04-23 00:18:20
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jiaolong11a

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

无图无真相啊，上个图看看来，亲。个人认为上面的条带只要不是很弥散就可以
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多情总被无情扰。。。愁
6楼2014-04-23 09:24:00
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lanlvmaomao

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lvbobo823 at 2014-03-12 21:34:33
样品都是这样的话，不可能都降解所以你再跑一下试试。RNA放-80可以很长时间。如果你暂时不用可以保存在75%酒精中在-20或-80。

好的
RNA测完整性电泳
IMG_20140420_225259.jpg
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7楼2014-04-23 23:07:44
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lanlvmaomao

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by jiaolong11a at 2014-04-23 09:24:00
无图无真相啊，上个图看看来，亲。个人认为上面的条带只要不是很弥散就可以

你看看
RNA测完整性电泳-1
IMG_20140420_225259.jpg
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8楼2014-04-23 23:08:38
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jonew

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
lanlvmaomao(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-04-23 23:43:58
怎么照成这个样子啊 ？  能不能用 看你后续试验的要求  我们如果P小片段 RNA降解了  照样做  但是要求高的话就不要往下做了  重新提取
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借口很贱，，，
9楼2014-04-23 23:33:31
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jiaolong11a

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by lanlvmaomao at 2014-04-23 23:08:38
你看看

IMG_20140420_225259.jpg
...

有些降解，但个人认为还可以用，你可以逆转录做下
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多情总被无情扰。。。愁
10楼2014-04-24 08:49:48
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