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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蛋白电泳做不好，求指导！
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曾凡逵

银虫 (正式写手)

[求助] 蛋白电泳做不好，求指导！ 已有2人参与

我碰到的问题是：小分子量的蛋白跑的很糟糕（不见了），Marker的最后一个条带和溴酚蓝重合了，配的凝胶是10%浓度。是不是我在灌注分离胶以后，水封用的水太多了，将分离胶的浓度稀释了，根本没达到10%？汪家政老师的书上说水封只要1-5mm，而我罐满了。
蛋白电泳做不好，求指导！
很明显上图中最后一个蛋白条带（绿色的，10kDa）已经和溴酚蓝重合了。正常的marker应该是下面这样的。
蛋白电泳做不好，求指导！-1

大家碰到过这样的情况没？请大家多提宝贵意见，着急死了。
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FKZeng
1楼 2014-02-23 15:04:43
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wangpeng227

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-02-23 23:51:57
曾凡逵: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-02-23 23:57:34
胶的浓度可以再高一点，12%或者15%的也行。不过大分子可能分辨不清，会挤在一起。
如果高分子量低分子量都要分辨清楚就得用梯度胶了。

水封对胶浓度不会有显著的影响。你跑的胶还算比较漂亮的。

祝实验顺利！
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2楼2014-02-23 16:11:42
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-02-23 23:52:03
曾凡逵: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-02-23 23:59:01
建议胶浓度提高些，水封影响较小没事。
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hehe
3楼2014-02-23 19:16:32
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