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曾凡逵

银虫 (正式写手)

[求助] 蛋白电泳做不好,求指导! 已有2人参与

我碰到的问题是:小分子量的蛋白跑的很糟糕(不见了),Marker的最后一个条带和溴酚蓝重合了,配的凝胶是10%浓度。是不是我在灌注分离胶以后,水封用的水太多了,将分离胶的浓度稀释了,根本没达到10%?汪家政老师的书上说水封只要1-5mm,而我罐满了。
蛋白电泳做不好,求指导!
很明显上图中最后一个蛋白条带(绿色的,10kDa)已经和溴酚蓝重合了。正常的marker应该是下面这样的。
蛋白电泳做不好,求指导!-1

大家碰到过这样的情况没?请大家多提宝贵意见,着急死了。
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FKZeng
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-02-23 23:52:03
曾凡逵: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-02-23 23:59:01
建议胶浓度提高些,水封影响较小没事。
hehe
3楼2014-02-23 19:16:32
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wangpeng227

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-02-23 23:51:57
曾凡逵: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-02-23 23:57:34
胶的浓度可以再高一点,12%或者15%的也行。不过大分子可能分辨不清,会挤在一起。
如果高分子量低分子量都要分辨清楚就得用梯度胶了。

水封对胶浓度不会有显著的影响。你跑的胶还算比较漂亮的。

祝实验顺利!
2楼2014-02-23 16:11:42
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