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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » DNS法测定发酵液总糖与还原糖
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小糊涂虫虫

至尊木虫 (职业作家)

[求助] DNS法测定发酵液总糖与还原糖 已有5人参与

DNS法测定发酵液总糖与还原糖，总糖先用盐酸水解，水解结束后条件pH至中性，然后比色；结果测定经过经常出现总糖比还原糖要小，不知道什么原因？
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ChanceonlyFavorsthePreparedMind~~~PennyWise,PoundFoolish~
1楼 2014-01-19 22:57:27
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

sunnymen

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
小糊涂虫虫: 金币+1 2014-01-28 19:26:08
发酵液测定前怎么处理的？建议你可以采用硫酸苯酚法测定总糖
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4楼2014-01-28 12:59:54
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fxgowen

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
小糊涂虫虫: 金币+3, ★有帮助 2014-02-09 14:51:15
原因可能有以下几点
1.总糖水解不充分。一般用2%硫酸120度下水解两个小时。
2.水解完了不用调pH中性，如果调过了碱性条件下糖会损失。
3.一定用不加DNS试剂的样品在同样条件下做参比，否则测得吸光度值不准确。
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7楼2014-01-30 09:45:48
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fanyao2010

铁虫 (初入文坛)
以前都菲林测定的，前期工作量很大，准备的东西很多，还要标滴定液
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生如夏花之绚烂，死如秋叶之静美
9楼2014-02-10 15:28:48
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普通回帖

影痕

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小糊涂虫虫: 金币+1, ★有帮助 2014-01-20 11:18:07
我们一般用菲林试剂测
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心中无敌则无敌于天下
2楼2014-01-20 09:26:12
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小糊涂虫虫

至尊木虫 (职业作家)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 影痕 at 2014-01-20 09:26:12
我们一般用菲林试剂测

菲林法测定复杂一些，有时候样品多，感觉DNS法快一些，只是有时候不是很稳定；
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ChanceonlyFavorsthePreparedMind~~~PennyWise,PoundFoolish~
3楼2014-01-20 11:19:05
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小糊涂虫虫

至尊木虫 (职业作家)
引用回帖:
4楼: Originally posted by sunnymen at 2014-01-28 12:59:54
发酵液测定前怎么处理的？建议你可以采用硫酸苯酚法测定总糖

过滤后，经过适当稀释 测定糖，
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ChanceonlyFavorsthePreparedMind~~~PennyWise,PoundFoolish~
5楼2014-01-28 19:26:00
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sjkr520

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你调整下pH，可能在中性条件下，一些不是还原性的糖异构成了还原性的糖
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6楼2014-01-30 04:11:59
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mao081312

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
小糊涂虫虫: 金币+1, 稀释倍数没问题， 2014-02-09 14:50:42
首先你要确认你的试剂稳定，即做标准曲线时r很大；其次你要评估下你的样品中总糖和还原糖含量是不是差不多，所以你说的情况是不是实验误差引起的；然后就是千万不要算错了，因为稀释倍数可能不一样，先稀释样品，再显色，希望你能详细描述下你的步骤，祝好

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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8楼2014-02-03 08:07:38
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sunlinahhxx

木虫 (初入文坛)
想问下，通过还原糖曲线查出来的浓度，怎么换算成总糖浓度？
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10楼2014-11-24 18:51:52
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