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donglining

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】DNS法测棕红色发酵培养基中还原糖能行吗 已有4人参与

大家好,我们实验室利用了国产试剂配的LB培养基,有点棕红色,   
我看DNS测还原糖原理是黄色的DNS与还原糖反应生成棕红色的物质,利用颜色深浅进行比色来测还原糖,
现在我的培养基就有点棕红色,这样测准吗?
我用没有接菌的培养基作为调0对照,效果也不太好,不知道有没有遇到这种情况的?  
烦请各位多多帮忙,挺急的,谢谢。
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jingcao3081

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我还真没这样做过!可以试试!
活到老!学到老!
2楼2011-04-10 23:04:44
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zier1011

木虫 (著名写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
rainwander(金币+2): 鼓励交流!!! 2011-04-12 19:58:47
rainwander(EPI+1): 鼓励交流~ 2011-04-18 13:30:53
这方法原理上就说不通,
你的培养基会变成棕红色,是因为其中的还原性糖和蛋白胨中氨基酸类物质发生反应,但这种反应并没有把糖和氨基酸完全消耗掉。所以你在用DNS法测还原性糖时,等于同时存在氨基酸类物质和DNS同时与还原性糖发生反应,其结果肯定异常。
花还香香的
3楼2011-04-12 13:52:45
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
rainwander(金币+5, EPI+1): 鼓励交流~ 2011-04-18 13:31:06
我现在做实验已经不用LB了,几年前用过,但是没想过是否对DNS测定还原糖有影响,看到这个帖子就有了点好奇心,做了一次。我们实验室用的药品是进口的,虽然配制出来没有多红,但似乎也对DNS法测定有些影响。我用超纯水配制了四种溶液(每种溶液为三管):
1、超纯水
2、含有0.1微克/微升葡萄糖的超纯水
3、LB
4、含有0.1微克/微升葡萄糖的LB
理论上显色之后吸光度1=3,2=4,2-1=4-3,但事实上不是




再配制一次溶液,两次结果相似。



所以楼主需慎重。话说过了好几天,楼主自己也应该做了很多实验了,就是不见回来。

[ Last edited by 冼亮淀粉酶 on 2011-4-18 at 00:38 ]
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
4楼2011-04-18 00:29:59
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hanguorui110

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
我觉得还是你从新配吧,方法是
1.        DNS溶液配制
称取(C4H4KNaO6.4H2O)257.76g(如果是无水酒石酸钾钠则为192g),溶于500mL蒸馏水中,加热(不超过50℃),于热溶液中依次加入3,5-二硝基水杨酸6.3g,NaOH 21.0g,苯酚5.0g,无水亚硫酸钠5.0g,搅拌至溶解完全,冷却后用蒸馏水定容至1000mL,贮存于棕色瓶中,室温保存。
估计你的dns过期了都多长时间了哈哈 我一般是半年重新配一遍,dns不是不好容吗你用超声波清洗器震一下就好了哈哈
鱼对水说你看不到我的眼泪,因为我在水里.水说我能感觉到你的眼泪,因为你在我心里。
5楼2011-05-23 16:10:20
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