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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 【求助/交流】DNS法测棕红色发酵培养基中还原糖能行吗
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donglining

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】DNS法测棕红色发酵培养基中还原糖能行吗 已有4人参与

大家好，我们实验室利用了国产试剂配的LB培养基，有点棕红色，   
我看DNS测还原糖原理是黄色的DNS与还原糖反应生成棕红色的物质，利用颜色深浅进行比色来测还原糖，
现在我的培养基就有点棕红色，这样测准吗？
我用没有接菌的培养基作为调0对照，效果也不太好，不知道有没有遇到这种情况的？  
烦请各位多多帮忙，挺急的，谢谢。
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1楼 2011-04-10 22:58:23
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jingcao3081

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我还真没这样做过！可以试试！
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活到老！学到老！
2楼2011-04-10 23:04:44
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zier1011

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+2): 鼓励交流！！！ 2011-04-12 19:58:47
rainwander(EPI+1): 鼓励交流~ 2011-04-18 13:30:53
这方法原理上就说不通，
你的培养基会变成棕红色，是因为其中的还原性糖和蛋白胨中氨基酸类物质发生反应，但这种反应并没有把糖和氨基酸完全消耗掉。所以你在用DNS法测还原性糖时，等于同时存在氨基酸类物质和DNS同时与还原性糖发生反应，其结果肯定异常。
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花还香香的
3楼2011-04-12 13:52:45
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★ ★ ★ ★ ★ ★
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rainwander(金币+5, EPI+1): 鼓励交流~ 2011-04-18 13:31:06
我现在做实验已经不用LB了，几年前用过，但是没想过是否对DNS测定还原糖有影响，看到这个帖子就有了点好奇心，做了一次。我们实验室用的药品是进口的，虽然配制出来没有多红，但似乎也对DNS法测定有些影响。我用超纯水配制了四种溶液（每种溶液为三管）：
1、超纯水
2、含有0.1微克/微升葡萄糖的超纯水
3、LB
4、含有0.1微克/微升葡萄糖的LB
理论上显色之后吸光度1=3，2=4，2-1=4-3，但事实上不是




再配制一次溶液，两次结果相似。



所以楼主需慎重。话说过了好几天，楼主自己也应该做了很多实验了，就是不见回来。

[ Last edited by 冼亮淀粉酶 on 2011-4-18 at 00:38 ]
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
4楼2011-04-18 00:29:59
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hanguorui110

木虫 (小有名气)
★
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我觉得还是你从新配吧，方法是
1.        DNS溶液配制
称取（C4H4KNaO6.4H2O）257.76g（如果是无水酒石酸钾钠则为192g），溶于500mL蒸馏水中，加热（不超过50℃），于热溶液中依次加入3，5-二硝基水杨酸6.3g，NaOH 21.0g，苯酚5.0g，无水亚硫酸钠5.0g，搅拌至溶解完全，冷却后用蒸馏水定容至1000mL，贮存于棕色瓶中，室温保存。
估计你的dns过期了都多长时间了哈哈 我一般是半年重新配一遍，dns不是不好容吗你用超声波清洗器震一下就好了哈哈
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鱼对水说你看不到我的眼泪，因为我在水里．水说我能感觉到你的眼泪，因为你在我心里。
5楼2011-05-23 16:10:20
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