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关于蒽酮法测总糖
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用蒽酮法测果实中总糖，样很多，麻烦虫友们给点建议吧。还没有开始做，有什么具体的方法或者注意事项，或者简单有效的方法，谢谢大家啦 [ 来自科研家族 OMICS家族 ] |
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dxxjhl
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【答案】应助回帖
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缺友情(金币+5, 农林EPI+1): 很专业，授予农林EPI，欢迎常来农林版！ 2011-12-14 11:55:33
xiaohaiyu(金币+5): 谢谢啦 2011-12-19 11:06:17
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xiaohaiyu(金币+5): 谢谢啦 2011-12-19 11:06:17
 可溶性糖测定有个过滤过程很麻烦额！！下面是实验步骤（李玲，2009，植物生理学模块实验指导（很好的一本实验指导书）） （一）可溶性糖的提取 称取新鲜果肉0.5-1.0g（或植物叶片或种子于105～110℃烘箱杀青15 min，然后将温度调至70～80℃烘干至恒重，磨碎烘干的叶片或种子），剪碎研磨至匀浆，倒入三角瓶（50ml）中,加入10mL80％乙醇，置于80℃水浴中不断搅拌40 min，冷却后4000g离心10min，残渣加5mL 80％乙醇重复提取2次，合并上清液。在收集液中加10 mg活性炭，80℃脱色30 min，过滤，80％乙醇定容至25mL，取滤液供测定。 （二）显色及比色 吸取上述乙醇提取液0.2mL加入0.8ml蒸馏水混合，再加入5mL蒽酮试剂，沸水浴中显色10 min，取出冷却。在波长625 nm处测吸光值。从标准曲线上查取可溶性糖的含量。 （三）绘制标准曲线 取标准葡萄糖溶液将其稀释成0～100 μg•mL-1的不同浓度的溶液（0、10、20、40、60、80、100 μg•mL-1）。分别取1 mL，按上述方法进行显色、比色，测定625 nm处的吸光值， 绘制标准曲线。 可溶性糖含量（mg/g）=C*V*n/a*W*1000 式中：C为查到的待测果实中葡萄糖含量（ug/ml）;a为样品提取液体积（ml）；V为提取液定容体积（ml）;n为稀释倍数；W为果实重量（g）  注意事项：1.蒽酮试剂与糖反应的呈色程度随时间发生变化，故样品要尽快比色； 2.显色反应非常灵敏，所用器皿需洁净！  楼主说样品多，实验量大，就预先找几个趁手的帮手，祝楼主试验顺利！！ |
3楼2011-12-14 11:16:19
xujj.sofia
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