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xiaohaiyu

金虫 (正式写手)

[求助] 关于蒽酮法测总糖

用蒽酮法测果实中总糖,样很多,麻烦虫友们给点建议吧。还没有开始做,有什么具体的方法或者注意事项,或者简单有效的方法,谢谢大家啦

[ 来自科研家族 OMICS家族 ]
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xiaohaiyu

金虫 (正式写手)

引用回帖:
: Originally posted by dxxjhl at 2011-12-14 11:16:19:
可溶性糖测定有个过滤过程很麻烦额!!
下面是实验步骤(李玲,2009,植物生理学模块实验指导(很好的一本实验指导书))
(一)可溶性糖的提取
    称取新鲜果肉0.5-1.0g(或植物叶片或种子于105~1 ...

谢谢啦
4楼2011-12-14 11:45:45
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查看全部 10 个回答

xujj.sofia

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
缺友情(金币+2): 鼓励新虫应助!可以把你做过的方法贴上来哦!欢迎常来农林版! 2011-12-14 11:13:25
书上不是都有么,我本科的时候测过的
2楼2011-12-14 10:56:33
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dxxjhl

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
缺友情(金币+5, 农林EPI+1): 很专业,授予农林EPI,欢迎常来农林版! 2011-12-14 11:55:33
xiaohaiyu(金币+5): 谢谢啦 2011-12-19 11:06:17
可溶性糖测定有个过滤过程很麻烦额!!
下面是实验步骤(李玲,2009,植物生理学模块实验指导(很好的一本实验指导书))
(一)可溶性糖的提取
    称取新鲜果肉0.5-1.0g(或植物叶片或种子于105~110℃烘箱杀青15 min,然后将温度调至70~80℃烘干至恒重,磨碎烘干的叶片或种子),剪碎研磨至匀浆,倒入三角瓶(50ml)中,加入10mL80%乙醇,置于80℃水浴中不断搅拌40 min,冷却后4000g离心10min,残渣加5mL 80%乙醇重复提取2次,合并上清液。在收集液中加10 mg活性炭,80℃脱色30 min,过滤,80%乙醇定容至25mL,取滤液供测定。
(二)显色及比色
   吸取上述乙醇提取液0.2mL加入0.8ml蒸馏水混合,再加入5mL蒽酮试剂,沸水浴中显色10 min,取出冷却。在波长625 nm处测吸光值。从标准曲线上查取可溶性糖的含量。
(三)绘制标准曲线
    取标准葡萄糖溶液将其稀释成0~100 μg•mL-1的不同浓度的溶液(0、10、20、40、60、80、100 μg•mL-1)。分别取1 mL,按上述方法进行显色、比色,测定625 nm处的吸光值,
绘制标准曲线。
可溶性糖含量(mg/g)=C*V*n/a*W*1000
式中:C为查到的待测果实中葡萄糖含量(ug/ml);a为样品提取液体积(ml);V为提取液定容体积(ml);n为稀释倍数;W为果实重量(g)

注意事项:
1.蒽酮试剂与糖反应的呈色程度随时间发生变化,故样品要尽快比色;
2.显色反应非常灵敏,所用器皿需洁净!

楼主说样品多,实验量大,就预先找几个趁手的帮手,祝楼主试验顺利!!
沉静太久,欲展翅高飞
3楼2011-12-14 11:16:19
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fengyu4500

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
缺友情(金币+1): 鼓励新虫应助!欢迎常来农林版! 2011-12-14 20:07:11
xiaohaiyu(金币+1): 谢谢啦 2011-12-19 11:06:55
看你做什么样品,要是是里面含脂肪多的还要去脂,另外一定要沸水浴后冰水冷却,尽快比色
5楼2011-12-14 17:01:01
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