24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

wybiology

捐助贵宾 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 640.4
散金: 70
红花: 1
帖子: 146
在线: 77.8小时
虫号: 2068699
注册: 2012-10-17
专业: 生物化学

[求助] 请问pcr产物约为450bp的大小，可以用来做 real time RT-PCR吗？已有1人参与

如题，我现在设计的引物所能扩增出来的产物只有400多bp的专一性最好，扩增效率也非常理想，所以我想用这对引物做real time pcr，可以吗？我也试过了设计其他引物来扩增100到200bp左右的产物，但是都不适合做real time pcr.
急，求回复。感谢有经验的高手解答疑惑！

回复此楼

» 猜你喜欢

为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种? 已经有5人回复
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》已经有3人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有75人回复
求助食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社电子版已经有5人回复
胶体几丁质的结晶度？已经有0人回复
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士已经有2人回复
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线已经有5人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

RT-PCR的标准曲线的构建相关已经有3人回复
SYBR green 1 real-time PCR 结果分析已经有4人回复
Real-time PCR溶解曲线Tm值，是不是在不同的仪器上做出来的不一样？已经有5人回复
求助microRNA real time pcr结果分析已经有4人回复
如果从来没做过RT-PCR，要上手而且把结果做得好大概要做多久啊？已经有17人回复
RT-PCR扩增目的基因片度大小是362bp，PCR的时候使用什么聚合酶好些呢？已经有5人回复
关于Real-time RT-PCR原理、操作过程及应用已经有13人回复
RT-PCR的cDNA不能扩增出目的条带，只有内参基因能扩增出来已经有14人回复
Real-Time PCR加样过程中的那些细节已经有19人回复
realtimePCR引物已经有11人回复
DGGE引物，real-time PCR引物和 clone library引物的转化问题已经有8人回复
请教real time pcr问题，谢谢！已经有10人回复
向RTPCR高手求助，关于RTPCR的空白对照问题已经有9人回复
做RT-PCR时该用哪段氨基酸序列设计引物已经有6人回复
RT-PCR 试验中扩增片段大小？已经有4人回复
ＲＴ－ＰＣＲ问题求助已经有18人回复
【求助/交流】荧光定量PCR与半定量的RT－PCR在设计引物时有什么区别？已经有8人回复
【求助/交流】RT-PCR ，内参在哪个步骤添加以及marker何时使用及确定？谢谢已经有14人回复
【求助/交流】做realtime-PCR，退火温度很重要吗？已经有15人回复
【专题】real time pcr目的基因的融解曲线不明白已经有8人回复

1楼2013-12-26 10:03:26

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

MolEPI: 10
应助: 1662 (讲师)
金币: 8693.8
红花: 72
帖子: 3516
在线: 456小时
虫号: 1614001
注册: 2012-02-13
专业: 生物化学

引用回帖:

8楼: Originally posted by 冷雁孤旅 at 2013-12-30 10:11:49
还有一个问题想要请教一下一直在困惑我我在提取RNA想要做逆转录之后半定量，事实上实验室条件有限 RNA很多时候都有降解，我打算用16s作为内参，在做半定量的额时候没问题吧？目的RNA降解，16S也跟着降解但是老 ...

用于做定量的RNA样品最好是没有降解的。你的导师说得对，不同的RNA的降解程度是不同的。由于mRNA是否有降解是很难判断的，只能以rRNA的完整性来推测。rRNA的质量越好，做出的定量数据越可信。