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新虫 (初入文坛)

[交流] 关于双酶切的酶的失活问题已有4人参与

最近实验要用到EcoRI和KpnI进行双酶切，且酶切以后需要进行后续的连接反应，EcoRI可以采用热失活灭活，但是KpnI在网上搜索发现不能热失活，想问下有做过这方面的能帮分析下吗？谢谢啦!!还有这两个酶进行双酶切过夜可以吗？

1楼 2013-12-23 22:42:03

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木虫 (正式写手)

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kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-12-24 08:24:15

双酶切后可以跑胶后割胶回收的方法进行纯化，回收后所有的酶全部除去~~，如果想过夜双酶切首先要看看两个酶的说明书确定两个酶的酶切buffer是否兼容，用不太兼容的buffer长时间酶切可能会诱发star活性~~，

大家相互帮助哈

3楼2013-12-24 00:30:13

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