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thinkerboy

铁虫 (小有名气)

[求助] 关于酶切位点 已有9人参与

我最近设计了一对引物,在引物外加了酶切位点GGGCCCTGATG,其中GGGCCC是酶切位点,从GC之间切开,ATG是起始密码子,在ATG之前加了个TG这会导致移码突变么,这会不会导致我的蛋白表达不出来,求做过的大神指点指点。
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luwei13566

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-01-29 16:13:39
你加的这两个碱基是保护碱基吧,话说~~你为什么不在酶切位点左侧加保护碱基??不会是避免引物内的颈环结构吧~,如果不是你加的这两个碱基完全没必要嘛~~
大家相互帮助哈
8楼2013-12-24 00:36:13
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秦守成

铁杆木虫 (著名写手)

秦博

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-12-24 00:27:54
thinkerboy: 金币+2 2013-12-24 13:32:29
自认为不会影响。
原因:由于没有破坏其它集团

[ 发自小木虫客户端 ]
开心快乐过一生
2楼2013-12-23 18:36:10
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yujitianqing

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
thinkerboy: 金币+2 2013-12-24 13:32:34
接入酶切位点后需要结合自己载体分析下是否会移码……
3楼2013-12-23 18:42:47
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shui_hanliu

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
thinkerboy: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-12-24 13:32:22
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-01-27 21:29:04
你都不加保护碱基的么,这样压根就切不开连不到载体上去,除非你用T载,另外,只要前面没有起始密码子就一般不会移码,要是前面就开始翻译了,那就要三个一组,ATG必须在一组内
4楼2013-12-23 18:44:55
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