24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

foxhuli

木虫 (正式写手)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 1721.9
帖子: 744
在线: 76.6小时
虫号: 2081443

[交流] 蛋白如何做质谱及分析

本人分子生物盲一名，近日想检验一个分子量为25KDa的蛋白，但是不知道该如何下手。听那个老师说分子量过大，要进行酶切，这一步如何做呢？我看文献用的胰蛋白酶啊。如果质谱做出来，是否有什么分析软件课推荐呢？是应该用生物质谱还是用液质联用呢？

回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

分子生化实验经验积累

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

原生质体瞬时表达后能提取蛋白质吗？已经有16人回复
质谱分析蛋白质已经有5人回复
蛋白质的共价修饰的测定的试验方法----凌波丽个人总结已经有19人回复
蛋白质糖基化位点鉴定已经有26人回复
液相-质谱分析中的一个问题求助各位大侠已经有10人回复
质谱分析蛋白质的问题已经有10人回复
SDS蛋白电泳胶的质谱检测问题已经有11人回复
关于LC-MS和MS/MS分析多肽氨基酸的问题已经有13人回复
蛋白质谱测定结果分析求助已经有5人回复
打算做蛋白组学的比较分析，是选择2-D好呢还是iTRAQ好呢？已经有6人回复
本人做ESI质谱，要知道从C14-C24的脂肪酸的相对分子质量，到处找不到，也不会算已经有3人回复
流动相中加了哪些酸可以进质谱？已经有9人回复
关于质谱测定蛋白质分子量的图谱分析已经有19人回复
懂质谱的高人请进，质谱分析蛋白质后的结果看不懂已经有13人回复
微生物发酵液中蛋白酶的种类如何界定？已经有3人回复
关于Thermo Fisher Scientific Exactive高分辨质谱系统能否测定蛋白已经有8人回复
求助，用LCMS做蛋白修饰位点分析已经有11人回复
蛋白氨基酸序列分析及二、三、四级结构的鉴定已经有33人回复
求助！切胶回收蛋白的方法已经有9人回复
【求助】飞行时间质谱如何将分子离子变成碎片离子已经有4人回复
【求助】做激光剥蚀等离子质谱应该如何准备！已经有16人回复

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴

1楼 2013-12-06 16:48:26

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)

应助: 397 (硕士)
贵宾: 0.015
金币: 7569.7
帖子: 1312
在线: 1350.9小时
虫号: 544795

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-01-05 15:55:35

引用回帖:

8楼: Originally posted by foxhuli at 2013-12-11 09:48:11
还想问一下，我的蛋白刚开始是用PBS溶的，2.5mg/kg，做质谱不能用磷酸盐，经过透析袋（没用过）透析去除磷酸盐，那么就应该剩下水了是吧？质谱不是要挥发性溶剂么？那怎么办啊？...

直接做ESI的不知道, 做过几次, 不是自己处理的样品
做MALDI的话,我用ziptip处理除盐,然后就直接点matrix了
做LC-MS/MS, 最后反正要把trypsin降解后的多肽片断萃取到acetonitrile和formic acid的水溶液中,然后最后真空抽干