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foxhuli

木虫 (正式写手)

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[交流] 蛋白如何做质谱及分析

本人分子生物盲一名，近日想检验一个分子量为25KDa的蛋白，但是不知道该如何下手。听那个老师说分子量过大，要进行酶切，这一步如何做呢？我看文献用的胰蛋白酶啊。如果质谱做出来，是否有什么分析软件课推荐呢？是应该用生物质谱还是用液质联用呢？

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1楼 2013-12-06 16:48:26

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fuyuandj86

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gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-01-05 15:55:35

引用回帖:

8楼: Originally posted by foxhuli at 2013-12-11 09:48:11
还想问一下，我的蛋白刚开始是用PBS溶的，2.5mg/kg，做质谱不能用磷酸盐，经过透析袋（没用过）透析去除磷酸盐，那么就应该剩下水了是吧？质谱不是要挥发性溶剂么？那怎么办啊？...

直接做ESI的不知道, 做过几次, 不是自己处理的样品
做MALDI的话,我用ziptip处理除盐,然后就直接点matrix了
做LC-MS/MS, 最后反正要把trypsin降解后的多肽片断萃取到acetonitrile和formic acid的水溶液中,然后最后真空抽干