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chemer

木虫 (正式写手)

[交流] 关于Thermo Fisher Scientific Exactive高分辨质谱系统能否测定蛋白 已有7人参与

我现有Thermo Fisher Scientific
Exactive高分辨质谱仪一台,不知这台仪器能否用来检测分子量在40kDa左右的蛋白,也就是说蛋白不水解,直接针泵进样,让蛋白分子带20个左右的电荷,使m/z在检测范围之内。
  我在测定时发现样品的电荷一般不超过2,不知是参数设定有问题还是仪器不能检测大分子物质。如果此台仪器可以检测蛋白的话,那在参数设置上有什么注意事项吗?
谢谢!
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dshlove

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
怎么会怀疑能不能测蛋白哦。
不要太好用好不好。
一直梦寐以求的机器啊。
有它,给我MALDI都不要。
2楼2012-06-04 14:23:09
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caff

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你确定你的蛋白能带那么多电荷吗,我用ESI只做到过一两万道尔顿的~
3楼2012-06-04 15:46:26
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chemer

木虫 (正式写手)

我现在能看到的最大电荷为2,请问您做一两万道尔顿的蛋白时是怎么设置参数的,谢谢
4楼2012-06-05 00:38:00
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huchen

新虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
soundhorizo: 金币+3, 感谢您的应助,欢迎常来分析版 ^^ 2012-06-05 08:39:04
楼主,你好,我也正在用此款仪器,蛋白是可以测试,我自己作到2万左右,但是最好要经过柱子(蛋白分析柱),还有BSA也可以测试出来,但是没有办法去用软件去分析,因为他所附带的软件去卷积做不到,公司给我的答复是,我们测试结果不理想,呵呵!
再者,MALDI我没有用过,说它比MALDI好用,我不这样认为,如果是LTQ-ORIB或许有可能,但是这款,至少我不这样认为!
5楼2012-06-05 08:31:35
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lzjessie_wlf

金虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
soundhorizo: 金币+3, 应助指数+1, 感谢交流 欢迎常来分析版O(∩_∩)O 2012-07-04 10:37:56
引用回帖:
5楼: Originally posted by huchen at 2012-06-05 08:31:35
楼主,你好,我也正在用此款仪器,蛋白是可以测试,我自己作到2万左右,但是最好要经过柱子(蛋白分析柱),还有BSA也可以测试出来,但是没有办法去用软件去分析,因为他所附带的软件去卷积做不到,公司给我的答复是,我们测试结 ...

Waters 的micromass 可以做到deconvolution 40kDa的
直接检测范围是m/z 4000

蛋白做ESI最应该除盐。因为盐会降低检测器的灵敏度。同时,带盐峰也会使谱图非常乱。不利于软件和人工数据分析。

如果谱图比较干净的话,可以人工作类似去卷积计算。
6楼2012-07-04 04:21:21
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cpn

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
样品不带不超过两个电荷,质荷比20kDa的离子也能被lz的仪器检测啊?扫描范围好宽额。
加个0.1%的甲酸吧,如果你的样品不会因为加入甲酸而快速降解的话。很容易就可以蛋白带上多电荷。偶用离子阱都可以测分子量12kDa的蛋白,与理论值只相差1Da。
7楼2012-08-09 12:56:38
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zz831024

金虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
40K的蛋白不算大,一般多肽都能带好几个电荷,何况是蛋白,只带两个不太正常。
8楼2012-08-12 20:13:12
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1845221

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
40kDa的蛋白肯定可以做的,ESI就能做,不要怀疑仪器不能做,质谱做蛋白是刚刚的,我估计是你什么地方设置的有问题,再研究研究吧。
宁静
9楼2012-08-12 20:44:50
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