[交流] 原生质体瞬时表达后能提取蛋白质吗？

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1楼2013-12-02 09:22:27

fatdahai

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可以，没问题的，做Western都可以。

2楼2013-12-02 10:39:29

fanwq258

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2楼: Originally posted by fatdahai at 2013-12-02 10:39:29
可以，没问题的，做Western都可以。

是这样的我将我的目的基因和GFP标签连接在一起原生质体共表达后，想得到与标签连接的目的蛋白的互作蛋白，请问，这样可以做到吗？要做质谱，提取的蛋白量够吗？

3楼2013-12-02 13:12:53

fatdahai

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fanwq258: 金币+10 2014-04-01 19:43:26

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3楼: Originally posted by fanwq258 at 2013-12-02 13:12:53
是这样的我将我的目的基因和GFP标签连接在一起原生质体共表达后，想得到与标签连接的目的蛋白的互作蛋白，请问，这样可以做到吗？要做质谱，提取的蛋白量够吗？...

做Western其实也要看你蛋白的表达量，有些容易杂到，有的蛋白也很难杂到，具体情况具体分析，质谱没做过，不敢妄下结论。

4楼2013-12-04 07:27:25

aoyiluo

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您好，我想问一下，如果目的基因是定位在细胞膜上，做原生质体的时候是不是需要marker基因？谢谢

6楼2014-02-10 14:35:00

fanwq258

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6楼: Originally posted by aoyiluo at 2014-02-10 14:35:00
您好，我想问一下，如果目的基因是定位在细胞膜上，做原生质体的时候是不是需要marker基因？谢谢...

那要看你是要干什么呢？

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aoyiluo

7楼2014-02-11 09:29:46

aoyiluo

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7楼: Originally posted by fanwq258 at 2014-02-11 09:29:46
那要看你是要干什么呢？
...

可以干什么呢？我不是很理解，我预测出来的目的基因定位在膜上，我想用实验验证一下，我的基因到底是定位在哪里的。谢谢您

8楼2014-02-17 09:56:10

fanwq258

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8楼: Originally posted by aoyiluo at 2014-02-17 09:56:10
可以干什么呢？我不是很理解，我预测出来的目的基因定位在膜上，我想用实验验证一下，我的基因到底是定位在哪里的。谢谢您...

那就把你的目的基因和荧光标签连起来，做个定位就好了吧

9楼2014-02-17 10:40:19

aoyiluo

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9楼: Originally posted by fanwq258 at 2014-02-17 10:40:19
那就把你的目的基因和荧光标签连起来，做个定位就好了吧...

恩恩，应该是这样，谢谢了

10楼2014-02-17 11:09:52

liru1988

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瞬时表达后提取蛋白的提取液用提取叶片的提取液可以吗？

11楼2014-06-23 09:31:46

fanwq258

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11楼: Originally posted by liru1988 at 2014-06-23 09:31:46
瞬时表达后提取蛋白的提取液用提取叶片的提取液可以吗？

应该可以吧，我没有做呢

12楼2014-06-23 14:45:10

liru1988

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12楼: Originally posted by fanwq258 at 2014-06-23 14:45:10
应该可以吧，我没有做呢...

嗯谢谢我是做了可是测不出蛋白总量愁

13楼2014-06-23 20:47:19

fanwq258

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13楼: Originally posted by liru1988 at 2014-06-23 20:47:19
嗯谢谢我是做了可是测不出蛋白总量愁...

做个westen看看

14楼2014-06-24 09:21:01

TYZHANG95

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想问如何提取原生质体蛋白？

15楼2018-10-24 19:20:13

noneily

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15楼: Originally posted by TYZHANG95 at 2018-10-24 12:20:13
想问如何提取原生质体蛋白？

请问提出来了么？我最近也在提效果不是很好

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16楼2019-03-08 15:29:27

Congcongaha

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你好，请问楼主原生质体提取蛋白实验做的怎么样了，有进展吗？最近也想做这个实验

17楼2019-03-12 11:39:29