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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 原生质体瞬时表达后能提取蛋白质吗？
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fanwq258

木虫 (正式写手)

[交流] 原生质体瞬时表达后能提取蛋白质吗？

如题，能够做到吗？提取的蛋白质量够吗？
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1楼 2013-12-02 09:22:27
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fatdahai

金虫 (初入文坛)
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gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-12-02 16:20:16
可以，没问题的，做Western都可以。
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2楼2013-12-02 10:39:29
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fanwq258

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fatdahai at 2013-12-02 10:39:29
可以，没问题的，做Western都可以。

是这样的 我将我的目的基因和GFP标签连接在一起原生质体共表达后，想得到与标签连接的目的蛋白的互作蛋白，请问，这样可以做到吗？要做质谱，提取的蛋白量够吗？
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3楼2013-12-02 13:12:53
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fatdahai

金虫 (初入文坛)
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fanwq258: 金币+10 2014-04-01 19:43:26
引用回帖:
3楼: Originally posted by fanwq258 at 2013-12-02 13:12:53
是这样的 我将我的目的基因和GFP标签连接在一起原生质体共表达后，想得到与标签连接的目的蛋白的互作蛋白，请问，这样可以做到吗？要做质谱，提取的蛋白量够吗？...

做Western其实也要看你蛋白的表达量，有些容易杂到，有的蛋白也很难杂到，具体情况具体分析，质谱没做过，不敢妄下结论。
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4楼2013-12-04 07:27:25
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aoyiluo

铜虫 (小有名气)
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3楼: Originally posted by fanwq258 at 2013-12-02 13:12:53
是这样的 我将我的目的基因和GFP标签连接在一起原生质体共表达后，想得到与标签连接的目的蛋白的互作蛋白，请问，这样可以做到吗？要做质谱，提取的蛋白量够吗？...

您好，我想问一下，如果目的基因是定位在细胞膜上，做原生质体的时候是不是需要marker基因？谢谢
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6楼2014-02-10 14:35:00
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fanwq258

木虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by aoyiluo at 2014-02-10 14:35:00
您好，我想问一下，如果目的基因是定位在细胞膜上，做原生质体的时候是不是需要marker基因？谢谢...

那要看你是要干什么呢？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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aoyiluo
7楼2014-02-11 09:29:46
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aoyiluo

铜虫 (小有名气)
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7楼: Originally posted by fanwq258 at 2014-02-11 09:29:46
那要看你是要干什么呢？
...

可以干什么呢？我不是很理解，我预测出来的目的基因定位在膜上，我想用实验验证一下，我的基因到底是定位在哪里的。谢谢您
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8楼2014-02-17 09:56:10
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fanwq258

木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by aoyiluo at 2014-02-17 09:56:10
可以干什么呢？我不是很理解，我预测出来的目的基因定位在膜上，我想用实验验证一下，我的基因到底是定位在哪里的。谢谢您...

那就把你的目的基因和荧光标签连起来，做个定位就好了吧
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9楼2014-02-17 10:40:19
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aoyiluo

铜虫 (小有名气)
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9楼: Originally posted by fanwq258 at 2014-02-17 10:40:19
那就把你的目的基因和荧光标签连起来，做个定位就好了吧...

恩恩，应该是这样，谢谢了
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10楼2014-02-17 11:09:52
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liru1988

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瞬时表达后提取蛋白的提取液用提取叶片的提取液可以吗？
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11楼2014-06-23 09:31:46
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fanwq258

木虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by liru1988 at 2014-06-23 09:31:46
瞬时表达后提取蛋白的提取液用提取叶片的提取液可以吗？

应该可以吧，我没有做呢
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12楼2014-06-23 14:45:10
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liru1988

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
12楼: Originally posted by fanwq258 at 2014-06-23 14:45:10
应该可以吧，我没有做呢...

嗯  谢谢  我是做了  可是测不出蛋白总量  愁
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13楼2014-06-23 20:47:19
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fanwq258

木虫 (正式写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by liru1988 at 2014-06-23 20:47:19
嗯  谢谢  我是做了  可是测不出蛋白总量  愁...

做个westen看看
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14楼2014-06-24 09:21:01
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TYZHANG95

新虫 (初入文坛)
★
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想问如何提取原生质体蛋白？
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15楼2018-10-24 19:20:13
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noneily

新虫 (初入文坛)
★
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15楼: Originally posted by TYZHANG95 at 2018-10-24 12:20:13
想问如何提取原生质体蛋白？

请问 提出来了么？我最近也在提 效果不是很好

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16楼2019-03-08 15:29:27
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Congcongaha

银虫 (小有名气)
★
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你好，请问楼主原生质体提取蛋白实验做的怎么样了，有进展吗？最近也想做这个实验
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17楼2019-03-12 11:39:29
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0506050445楼
2013-12-04 08:46   回复  
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