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foxhuli

木虫 (正式写手)


[交流] 蛋白如何做质谱及分析

本人分子生物盲一名,近日想检验一个分子量为25KDa的蛋白,但是不知道该如何下手。听那个老师说分子量过大,要进行酶切,这一步如何做呢?我看文献用的胰蛋白酶啊。   如果质谱做出来,是否有什么分析软件课推荐呢?是应该用生物质谱还是用液质联用呢?
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shasha沙

铜虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
送红花一朵
引用回帖:
9楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2013-12-11 10:05:36
直接做ESI的不知道, 做过几次, 不是自己处理的样品
做MALDI的话,我用ziptip处理除盐,然后就直接点matrix了
做LC-MS/MS, 最后反正要把trypsin降解后的多肽片断萃取到acetonitrile和formic acid的水溶液中,然后最后 ...

我想问一下,多肽片段怎么萃取到乙腈和甲酸的水溶液中?乙腈和甲酸都是溶于水的啊?
11楼2014-01-04 20:21:00
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fuyuandj86

版主 (著名写手)


★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-12-07 14:10:06
你可以用LC-MS/MS用trypsin酶切
这个分子量也可以不用酶切, 直接做MALDI,
ESI理论上也能也能看到峰, 只是会带多电荷, 所以看到的大概会比较乱
2楼2013-12-07 02:17:26
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jinwei331

至尊木虫 (文坛精英)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
…………………………
3楼2013-12-07 06:12:55
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
PAGE电泳,染色,然后交给公司处理了。生工做质谱一个样品600元。
5楼2013-12-07 12:52:58
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