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蛋白如何做质谱及分析
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foxhuli
木虫
(正式写手)
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帖子: 744
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虫号: 2081443
[交流]
蛋白如何做质谱及分析
本人分子生物盲一名,近日想检验一个分子量为25KDa的蛋白,但是不知道该如何下手。听那个老师说分子量过大,要进行酶切,这一步如何做呢?我看文献用的胰蛋白酶啊。 如果质谱做出来,是否有什么分析软件课推荐呢?是应该用生物质谱还是用液质联用呢?
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shasha沙
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9楼
:
Originally posted by
fuyuandj86
at 2013-12-11 10:05:36
直接做ESI的不知道, 做过几次, 不是自己处理的样品
做MALDI的话,我用ziptip处理除盐,然后就直接点matrix了
做LC-MS/MS, 最后反正要把trypsin降解后的多肽片断萃取到acetonitrile和formic acid的水溶液中,然后最后 ...
我想问一下,多肽片段怎么萃取到乙腈和甲酸的水溶液中?乙腈和甲酸都是溶于水的啊?
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11楼
2014-01-04 20:21:00
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fuyuandj86
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kx444555: 金币+3, 鼓励交流
2013-12-07 14:10:06
你可以用LC-MS/MS用trypsin酶切
这个分子量也可以不用酶切, 直接做MALDI,
ESI理论上也能也能看到峰, 只是会带多电荷, 所以看到的大概会比较乱
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2楼
2013-12-07 02:17:26
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jinwei331
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2013-12-07 06:12:55
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jurkat.1640
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PAGE电泳,染色,然后交给公司处理了。生工做质谱一个样品600元。
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2013-12-07 12:52:58
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