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质粒连接问题
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我是新手，，最近在做质粒连接 用的是pGl3p做载体，用fse1+xba1双酶切，做了去磷酸化，然后测其浓度只有200ng/ul，我的目的片段只有40bp，做连接的步骤如下 fragment 10ul vector 2ul T4ligase 1.5ul buffer 1.5ul 16℃ 过夜，做转化，但总是做不出，，，求高手指点，，谢谢大家！！ |
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