24小时热门版块排行榜    

查看: 1893  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

积云降晚露

新虫 (小有名气)

[求助] 线粒体长片段扩增总是失败,有什么好的建议吗? 已有3人参与

我用的longPCR反应程序试过几种不同的方法,前后也设计了数对引物,均没有好的效果,至今只有一对引物偶能出来疑似目的长度的片段,尝试送测多次都没测出来。。引物做梯度退火没有效果。。期间也换了LA Taq酶,结果扩出来的像marker一样,还是测不出。。请问还有什么办法吗?感激!

[ Last edited by silicare on 2014-2-17 at 11:58 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

可以试试体系中加点甜菜碱。据说甜菜碱对扩增长片段有帮助的,。
4楼2014-02-17 11:18:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

kentgrey

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2014-02-03 02:57:26
可以试试将这个长片段分成两部分克啊
前提是在NCBI上找得到中间片段相似部分,再根据保守序列多设计几对引物
按线粒体的自身性质,母系遗传来找参考基因设计引物
2楼2014-02-02 23:06:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

积云降晚露

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by kentgrey at 2014-02-02 23:06:10
可以试试将这个长片段分成两部分克啊
前提是在NCBI上找得到中间片段相似部分,再根据保守序列多设计几对引物
按线粒体的自身性质,母系遗传来找参考基因设计引物

谢谢您的建议~不过我缺的那段包含控制区,变异大,已经找不到中间可以设计引物的地方了。。唉。。。
3楼2014-02-16 17:48:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sandse7en

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-02-17 11:18:17
可以试试体系中加点甜菜碱。据说甜菜碱对扩增长片段有帮助的,。

请问有相关文献么
落花无言
5楼2014-02-23 16:56:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿北京化工大学070300 学硕336求调剂 +4 vv迷 2026-03-21 5/250 2026-03-22 08:38 by ChemPharm
[考研] 085600材料与化工306 +4 z1z2z3879 2026-03-21 4/200 2026-03-21 23:44 by ms629
[考研] 297求调剂 +3 喜欢还是不甘心 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:33 by 学员8dgXkO
[考研] 296求调剂 +4 www_q 2026-03-20 4/200 2026-03-21 17:26 by 学员8dgXkO
[考研] 299求调剂 +5 shxchem 2026-03-20 7/350 2026-03-21 17:09 by ColorlessPI
[考研] 268求调剂 +9 简单点0 2026-03-17 9/450 2026-03-21 15:37 by lature00
[考研] 279求调剂 +5 红衣隐官 2026-03-21 5/250 2026-03-21 14:59 by lature00
[考研] 070300化学319求调剂 +7 锦鲤0909 2026-03-17 7/350 2026-03-21 03:46 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华南师大 070300(化学)304分求调剂 +3 0703武芊慧雪304 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:48 by JourneyLucky
[考研] 南京大学化学376求调剂 +3 hisfailed 2026-03-19 6/300 2026-03-20 23:43 by hisfailed
[考研] 求调剂,一志愿:南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕,总分289分 +4 @taotao 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:14 by JourneyLucky
[考研] 求调剂一志愿南京航空航天大学289分 +3 @taotao 2026-03-19 3/150 2026-03-20 21:34 by JourneyLucky
[考研] A区线材料学调剂 +5 周周无极 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:33 by laoshidan
[考研] 一志愿 南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕 +5 @taotao 2026-03-20 5/250 2026-03-20 20:16 by JourneyLucky
[考研] 319求调剂 +3 小力气珂珂 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:47 by JourneyLucky
[考研] 0856调剂,是学校就去 +8 sllhht 2026-03-19 9/450 2026-03-20 14:25 by 无懈可击111
[考研] 298-一志愿中国农业大学-求调剂 +9 手机用户 2026-03-17 9/450 2026-03-20 14:24 by 无懈可击111
[考研] 085410人工智能专硕317求调剂(0854都可以) +4 xbxudjdn 2026-03-18 4/200 2026-03-20 09:07 by 不168
[考研] 085600材料与化工调剂 324分 +10 llllkkkhh 2026-03-18 12/600 2026-03-19 14:33 by llllkkkhh
[论文投稿] 有没有大佬发小论文能带我个二作 +3 增锐漏人 2026-03-17 4/200 2026-03-17 09:26 by xs74101122
信息提示
请填处理意见