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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】求助如何获得cDNA片段的全长？
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bbyu007

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】求助如何获得cDNA片段的全长？ 已有7人参与

我现在有个新的课题，就是先要尽量多的拿到一个基因家族的全长cDNA，然后再分别研究功能或系统分析等。

我在NCBI和其他EST数据库搜索到该家族的一些已经发表了的序列，其中绝大多数都是部分长的cDNA片段，我想以这些片段为基础获得它们的cDNA全长。

我初步查了一些资料，发现要做3‘和5’ race，是不是应该先做3‘的再做5’的呢？还有其他什么实验方法能获得全长呢？这个课题时间比较紧，3‘和5’ race的效率如何啊？有更好更快的办法吗？特来求助大家~~~

谢谢~~~~
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我是笨笨鱼~~~
1楼 2010-05-17 18:52:15
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zcqcau

铁杆木虫 (著名写手)
bbyu007(金币+2):很感谢。 2010-05-17 19:11:07
很抱歉的告诉你，没有别的办法，只有做3‘和5’RACE，才能得到全长。或者包给公司去做（费用比较高）。或者找好朋友帮着做，不过费用很高，你或许也要给人家钱才行，时间快的话，1个月或1个半月差不多就能出来了
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将有能量帮助他人作为自己的人生追求！
2楼2010-05-17 19:08:49
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bbyu007

木虫 (正式写手)
贵，而且周期长。。。是吗？

那我什么时候才能拿到尽可能多的全长啊。。。
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我是笨笨鱼~~~
3楼2010-05-17 19:12:03
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hyw1989960

木虫 (正式写手)

快乐家族二十八
bbyu007(金币+1):好的试剂盒确实很贵。。。 2010-05-18 09:09:22
这不一定，运气好的话，很快的，一两个星期差不多。3‘RACE好做。关键是5’RACE，做这个可以用试剂盒，是挺贵的，要几千，谁叫人家那酶特殊呢！哎！
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快乐家族
4楼2010-05-17 21:02:24
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小白兄

金虫 (小有名气)
bbyu007(金币+1):谢谢 2010-05-18 09:10:19
好像很难，问公司可不可以做吧，自己摸条件肯定很难
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时光如流水，匆匆而过。
5楼2010-05-17 21:11:18
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gene001

金虫 (正式写手)

就是个普通教师
bbyu007(金币+1):谢谢 2010-05-18 09:10:14
买好点的试剂盒，先做哪个都行，总之保证RNA提取质量的前提下，采用较好些的试剂盒你的进展会快一些！！！
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大家共同交流、共同提高！！！
6楼2010-05-17 23:31:38
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匿名

用户注销 (著名写手)
bbyu007(金币+2):全长cdna文库不好建。。。全长的啊。。。 2010-05-18 09:10:54
本帖仅楼主可见
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7楼2010-05-18 01:26:25
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jasco

木虫 (正式写手)
bbyu007(金币+1):全长cdna文库不好建。。。 2010-05-18 09:11:18
建立全长cDNA文库最快
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8楼2010-05-18 09:06:23
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hanyy2009

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
5‘ 的可以做Tail-PCR， 比较容易，不用加尾。
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9楼2011-11-15 16:10:22
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wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
如果单搞都拿不到全长,全长cDNA文库未必就能拿到全长!
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真相是最大的奢侈品
10楼2011-11-15 17:05:32
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