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【求助/交流】求助如何获得cDNA片段的全长?
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bbyu007
木虫
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[交流]
【求助/交流】求助如何获得cDNA片段的全长?
已有7人参与
我现在有个新的课题,就是先要尽量多的拿到一个基因家族的全长cDNA,然后再分别研究功能或系统分析等。
我在NCBI和其他EST数据库搜索到该家族的一些已经发表了的序列,其中绝大多数都是部分长的cDNA片段,我想以这些片段为基础获得它们的cDNA全长。
我初步查了一些资料,发现要做3‘和5’ race,是不是应该先做3‘的再做5’的呢?还有其他什么实验方法能获得全长呢?这个课题时间比较紧,3‘和5’ race的效率如何啊?有更好更快的办法吗?特来求助大家~~~
谢谢~~~~
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我是笨笨鱼~~~
1楼
2010-05-17 18:52:15
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gene001
金虫
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专业: 微生物遗传育种学
bbyu007(金币+1):谢谢 2010-05-18 09:10:14
买好点的试剂盒,先做哪个都行,总之保证RNA提取质量的前提下,采用较好些的试剂盒你的进展会快一些!!!
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大家共同交流、共同提高!!!
6楼
2010-05-17 23:31:38
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zcqcau
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专业: 植物化学保护
bbyu007(金币+2):很感谢。 2010-05-17 19:11:07
很抱歉的告诉你,没有别的办法,只有做3‘和5’RACE,才能得到全长。或者包给公司去做(费用比较高)。或者找好朋友帮着做,不过费用很高,你或许也要给人家钱才行,时间快的话,1个月或1个半月差不多就能出来了
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2楼
2010-05-17 19:08:49
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bbyu007
木虫
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虫号: 482918
注册: 2007-12-26
性别: GG
贵,而且周期长。。。是吗?
那我什么时候才能拿到尽可能多的全长啊。。。
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我是笨笨鱼~~~
3楼
2010-05-17 19:12:03
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hyw1989960
木虫
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快乐家族二十八
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专业: 植物生理与生化
bbyu007(金币+1):好的试剂盒确实很贵。。。 2010-05-18 09:09:22
这不一定,运气好的话,很快的,一两个星期差不多。3‘RACE好做。关键是5’RACE,做这个可以用试剂盒,是挺贵的,要几千,谁叫人家那酶特殊呢!哎!
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快乐家族
4楼
2010-05-17 21:02:24
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