24小时热门版块排行榜    

查看: 3265  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zr1140861173

铁虫 (小有名气)

[求助] 目的基因与载体连接问题

我PCR的目的基因4600bp,想直接去连接载体pPIC3.5k(大概9000bp),按照正常的连接过程一直都连接不上,各位有谁做过类似的实验吗,求帮助啊!!!!!!
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

实验交流

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

这是我自己选择的道路,我不需要怜悯,亦没必要动摇,生也是我,死也是我,胜固欣然,败也从容
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dang_qi

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
两个太大的确不太好连,我之前做过4K+5K
建议质粒进行两次单酶切,时间可以长一点
还有就是坚持,太大了没办法
手指所触碰到的距离必有你所期待的风景.
7楼2013-11-30 17:13:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

dnacomputer

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-11-28 14:57:24
载体太大了,换个小载体试试。克隆成功以后再转到这个大载体中

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2013-11-28 14:56:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuht1983

新虫 (初入文坛)

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+3, 鼓励新虫发帖交流,欢迎常来! 2013-11-28 18:03:34
本帖内容被屏蔽

3楼2013-11-28 16:57:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guoyanfei

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-11-29 14:14:06
PCR片段有点大,你试着把链接体系中的目的片段量降低,降到跟载体差不多或者稍微比载体量多一些,延长链接时间;另外要确保载体和片段酶切充分,并且酶切位点正确,不要有星活性出现;
4楼2013-11-29 08:41:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿西南交通 专硕 材料355 本科双非 求调剂 +3 西南交通专材355 2026-03-19 3/150 2026-03-20 09:34 by 每天只摆一小会
[考研] 265求调剂 +6 梁梁校校 2026-03-17 6/300 2026-03-20 08:59 by ZHANG0tao
[考研] 295材料求调剂,一志愿武汉理工085601专硕 +3 Charlieyq 2026-03-19 3/150 2026-03-20 08:53 by xingguangj
[论文投稿] 申请回稿延期一个月,编辑同意了。但系统上的时间没变,给编辑又写邮件了,没回复 10+3 wangf9518 2026-03-17 4/200 2026-03-19 23:55 by babero
[考研] 321求调剂 +8 何润采123 2026-03-18 10/500 2026-03-19 16:46 by 何润采123
[考博] 东华理工大学化材专业26届硕士博士申请 +8 zlingli 2026-03-13 8/400 2026-03-19 16:32 by 轻松不少随
[考研] 材料与化工求调剂 +7 为学666 2026-03-16 7/350 2026-03-19 14:48 by 尽舜尧1
[考研] 286求调剂 +6 lemonzzn 2026-03-16 10/500 2026-03-19 14:31 by lemonzzn
[考研] 324分 085600材料化工求调剂 +3 llllkkkhh 2026-03-18 3/150 2026-03-19 14:22 by houyaoxu
[考研] 346求调剂[0856] +3 WayneLim327 2026-03-16 6/300 2026-03-19 11:21 by WayneLim327
[考研] 268求调剂 +6 简单点0 2026-03-17 6/300 2026-03-18 09:04 by 无际的草原
[考研] 278求调剂 +5 烟火先于春 2026-03-17 5/250 2026-03-18 08:43 by 星空星月
[考研] 326求调剂 +5 上岸的小葡 2026-03-15 6/300 2026-03-17 17:26 by ruiyingmiao
[考博] 26申博 +4 八6八68 2026-03-16 4/200 2026-03-17 13:00 by 轻松不少随
[考研] 11408 一志愿西电,277分求调剂 +3 zhouzhen654 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:03 by laoshidan
[考研] 机械专硕325,寻找调剂院校 +3 y9999 2026-03-15 5/250 2026-03-16 19:58 by y9999
[考研] 一志愿211 0703方向310分求调剂 +3 努力奋斗112 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:44 by houyaoxu
[考研] 0856求调剂 +3 刘梦微 2026-03-15 3/150 2026-03-16 10:00 by houyaoxu
[考研] 本科南京大学一志愿川大药学327 +3 麦田耕者 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:04 by 外星文明
[考研] 330求调剂 +3 ?酱给调剂跪了 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:13 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见