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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » RNA没条带，怎么cDNA会有条带呢？
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孙小爽

铁虫 (初入文坛)

[求助] RNA没条带，怎么cDNA会有条带呢？

在用DNA酶处理过的RNA跑不出条带，可是将其反转录成cDNA后，用内参18s扩增出了条带这是为什么呢？是RNA浓度低吗？
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1楼 2013-11-20 13:21:22
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孙小爽

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-11-20 13:39:02
检查RNA电泳时上样量是多少？扩增18S时是否做了负对照？（以无逆转录酶的反转录产物为模板）。如果负对照也能P出来，说明RNA样品中含有痕量gDNA。

那之前已经用DNA酶没有处理干净吗？处理后怎么什么条带也没有啊
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3楼2013-11-20 14:11:19
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2013-11-20 17:56:14
检查RNA电泳时上样量是多少？扩增18S时是否做了负对照？（以无逆转录酶的反转录产物为模板）。如果负对照也能P出来，说明RNA样品中含有痕量gDNA。
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2楼2013-11-20 13:39:02
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 孙小爽 at 2013-11-20 14:11:19
那之前已经用DNA酶没有处理干净吗？处理后怎么什么条带也没有啊...

DNase处理是否干净要做负对照，或者你直接把处理过的RNA取为模板PCR，检测是能P出带来。处理后DNA被消化，理论上RNA应该不受影响。如果是总RNA，处理前跑电泳看RNA了吗？
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4楼2013-11-21 06:43:14
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