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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » western blot实验求助
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mxl831

铜虫 (初入文坛)

[求助] western blot实验求助

大鼠肝脏样品-80度保存有一年半左右了，还能做western blot实验吗？现在提了蛋白然后在做，但是没做出来，整张膜什么都没有，不知道是样品问题还是其他的问题。现在的蛋白是凯基的裂解液直接提的，煮过和没煮过的都做了，煮过后里面会有颗粒的沉淀，提取出来的蛋白离心后也不是完全澄清的液体。
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1楼 2013-11-18 09:50:46
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xiangyu9356

至尊木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-11-18 11:01:23
-80度保存组织一般是3个月的保质期。不建议再做你的这批样品。
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mxl831
满堂花醉三千客，更无一人是知音。
2楼2013-11-18 10:03:52
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daibingling

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-11-18 11:01:27
mxl831: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2013-11-18 11:47:27
首先你可以把整块胶用考马斯亮蓝染，看有没有条带，然后再进行转膜，如果胶上就没有蛋白，转膜真的是浪费
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3楼2013-11-18 10:42:48
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mxl831

铜虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by xiangyu9356 at 2013-11-18 10:03:52
-80度保存组织一般是3个月的保质期。不建议再做你的这批样品。

还是想再试试看，呵呵，谢谢！
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4楼2013-11-18 11:48:24
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zh10246

铁杆木虫 (文坛精英)
用细胞裂解液做阳性对照，证明你的抗体是好的
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5楼2013-11-18 20:16:00
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1217253647

新虫 (初入文坛)
做个考马斯亮蓝或丽春红看看蛋白提的咋样。
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6楼2014-01-19 23:05:44
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