24小时热门版块排行榜    

查看: 1779  |  回复: 7

潘蕾

新虫 (初入文坛)

[求助] DKK4基因的克隆,我现在

Sample Text
各位大神,请问有谁做过或者正在研究DKK4基因,我现在要克隆DKK4的序列,序列信息是参考人的DKK4,模板是家兔RNA反转录的cDNA,但是一直都P不出来,换了几对引物也没有结果。恳请帮助。谢谢,
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-11-17 12:36:08
你是想克隆人的DKK4基因还是家兔的DKK4基因序列

如果是人的,你应该用人的cDNA做模板

如果是克隆兔的,你应该设计兼并引物进行PCR,而不是简单的根据人的序列设计引物来扩增兔的序列
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2013-11-16 18:10:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

潘蕾

新虫 (初入文坛)

家兔的。兼并引物?!这个我还不了解,我去查查。谢谢您哦,

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2013-11-17 00:13:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

soarrow

铁杆木虫 (正式写手)

酱油歪楼党

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-11-17 12:36:13
兔的DKK4基因序列在NCBI可以查到,去检索、下载下来再设计RT-PCR的引物好了。
还可以把兔的和人的比较一下,其它还有猪、鼠什么的也可以比较一下,选择跟人最接近的来做可能更好

4楼2013-11-17 11:37:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

潘蕾

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by soarrow at 2013-11-17 11:37:10
兔的DKK4基因序列在NCBI可以查到,去检索、下载下来再设计RT-PCR的引物好了。
还可以把兔的和人的比较一下,其它还有猪、鼠什么的也可以比较一下,选择跟人最接近的来做可能更好


兔的DKK4基因序列在NCBI可以查不到啊?请问您是怎么查到的?新人求指导!
5楼2013-11-19 08:46:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sinoer

铜虫 (小有名气)


如果不确定的序列,那么你需要建库了
6楼2013-11-19 09:23:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

soarrow

铁杆木虫 (正式写手)

酱油歪楼党

引用回帖:
5楼: Originally posted by 潘蕾 at 2013-11-19 08:46:08
兔的DKK4基因序列在NCBI可以查不到啊?请问您是怎么查到的?新人求指导!...

hehe,,,看看这两个链接,我当时没细看,也就是粗略瞅了一下,你看看吧,希望有所帮助

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/protein/291409033

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/291409032

7楼2013-11-19 13:07:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

潘蕾

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by soarrow at 2013-11-19 13:07:45
hehe,,,看看这两个链接,我当时没细看,也就是粗略瞅了一下,你看看吧,希望有所帮助

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/protein/291409033

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/291409032

...

谢谢,不过这个跟我要的基因不是同一个!
8楼2013-11-26 15:13:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 潘蕾 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +23 医学老男孩 2026-08-13 49/2450 2026-08-14 20:02 by zhaifei
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +6 启萌科技 2026-08-12 21/1050 2026-08-14 19:48 by 启萌科技
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +5 Ldrop2023 2026-08-13 5/250 2026-08-14 18:48 by ssxclkj
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +5 工厂打螺丝 2026-08-08 5/250 2026-08-14 11:03 by 玖戈弋
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[硕博家园] 一作与独作在应聘高校教师时区别大吗 +3 mbygzh 2026-08-08 4/200 2026-08-13 19:31 by 龙-樱
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
信息提示
请填处理意见