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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于未知基因克隆
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Alex_ppz

木虫 (小有名气)

[求助] 关于未知基因克隆

小虫导师要求从ssh筛选出的部分基因片段克隆得到全长，物种是菲律宾蛤仔，目前没有查到同源已知基因，而且也不清楚该基因长度，应该怎么办？请各位大虾帮帮忙！十分感谢！
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加油~~~
1楼 2012-08-21 09:11:35
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tianyinghu

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
反向PCR，锚定PCR等好多方法都可以做到的。
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2楼2012-08-21 09:50:14
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Alex_ppz

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by tianyinghu at 2012-08-21 09:50:14
反向PCR，锚定PCR等好多方法都可以做到的。

关键是引物怎么设计
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加油~~~
3楼2012-08-21 09:53:57
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sunjiutong

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
很简单，利用RACE方法，买个RACE试剂盒，一切都搞定
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所谓梦想，只有醒来才有可能实现
4楼2012-08-21 10:26:24
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Alex_ppz

木虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by sunjiutong at 2012-08-21 10:26:24
很简单，利用RACE方法，买个RACE试剂盒，一切都搞定

这我知道，关键是引物设计怎么设计
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加油~~~
5楼2012-08-21 10:49:33
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sunjiutong

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by Alex_ppz at 2012-08-21 10:49:33
这我知道，关键是引物设计怎么设计...

就拿已知的序列作为设计引物的模板。往上游走，利用5‘RACE克隆5’段，往下游走，利用3‘RACE克隆3’端
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所谓梦想，只有醒来才有可能实现
6楼2012-08-21 15:36:06
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ahsy

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

关键是引物怎么设计，利用5‘RACE克隆5’段，往下游走，利用3‘RACE克隆3’端
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7楼2012-09-24 10:42:33
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