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Alex_ppz

木虫 (小有名气)

[求助] 关于未知基因克隆

小虫导师要求从ssh筛选出的部分基因片段克隆得到全长,物种是菲律宾蛤仔,目前没有查到同源已知基因,而且也不清楚该基因长度,应该怎么办?请各位大虾帮帮忙!十分感谢!
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加油~~~
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tianyinghu

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
反向PCR,锚定PCR等好多方法都可以做到的。
2楼2012-08-21 09:50:14
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Alex_ppz

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by tianyinghu at 2012-08-21 09:50:14
反向PCR,锚定PCR等好多方法都可以做到的。

关键是引物怎么设计
加油~~~
3楼2012-08-21 09:53:57
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sunjiutong

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
很简单,利用RACE方法,买个RACE试剂盒,一切都搞定
所谓梦想,只有醒来才有可能实现
4楼2012-08-21 10:26:24
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Alex_ppz

木虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by sunjiutong at 2012-08-21 10:26:24
很简单,利用RACE方法,买个RACE试剂盒,一切都搞定

这我知道,关键是引物设计怎么设计
加油~~~
5楼2012-08-21 10:49:33
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sunjiutong

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by Alex_ppz at 2012-08-21 10:49:33
这我知道,关键是引物设计怎么设计...

就拿已知的序列作为设计引物的模板。往上游走,利用5‘RACE克隆5’段,往下游走,利用3‘RACE克隆3’端
所谓梦想,只有醒来才有可能实现
6楼2012-08-21 15:36:06
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ahsy

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

关键是引物怎么设计,利用5‘RACE克隆5’段,往下游走,利用3‘RACE克隆3’端
7楼2012-09-24 10:42:33
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