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潘蕾

新虫 (初入文坛)

[求助] DKK4基因的克隆,我现在

Sample Text
各位大神,请问有谁做过或者正在研究DKK4基因,我现在要克隆DKK4的序列,序列信息是参考人的DKK4,模板是家兔RNA反转录的cDNA,但是一直都P不出来,换了几对引物也没有结果。恳请帮助。谢谢,
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soarrow

铁杆木虫 (正式写手)

酱油歪楼党

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-11-17 12:36:13
兔的DKK4基因序列在NCBI可以查到,去检索、下载下来再设计RT-PCR的引物好了。
还可以把兔的和人的比较一下,其它还有猪、鼠什么的也可以比较一下,选择跟人最接近的来做可能更好

4楼2013-11-17 11:37:10
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查看全部 8 个回答

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-11-17 12:36:08
你是想克隆人的DKK4基因还是家兔的DKK4基因序列

如果是人的,你应该用人的cDNA做模板

如果是克隆兔的,你应该设计兼并引物进行PCR,而不是简单的根据人的序列设计引物来扩增兔的序列
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2013-11-16 18:10:49
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潘蕾

新虫 (初入文坛)

家兔的。兼并引物?!这个我还不了解,我去查查。谢谢您哦,

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2013-11-17 00:13:45
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潘蕾

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by soarrow at 2013-11-17 11:37:10
兔的DKK4基因序列在NCBI可以查到,去检索、下载下来再设计RT-PCR的引物好了。
还可以把兔的和人的比较一下,其它还有猪、鼠什么的也可以比较一下,选择跟人最接近的来做可能更好


兔的DKK4基因序列在NCBI可以查不到啊?请问您是怎么查到的?新人求指导!
5楼2013-11-19 08:46:08
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