版块导航: 正在加载中...

客户端APP下载

调剂小程序

登录注册

应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜

LWL8798

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 876.5
帖子: 19
在线: 72.2小时
虫号: 1756213
注册: 2012-04-15
专业: 药理学其他科学问题

[求助] 表达载体连接失败

我的目的片段大概1700bp，连接T载体成功，然后用BamHI与NdeI双酶切连在表达载体上，就是这一步一直连不上，以前的时候很好连的，就最近，连T载体的没有问题，难道是我的表达载体出错了么？

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

连接问题求助高手已经有10人回复
同尾酶连接效率问题，求助已经有3人回复
平末端加A尾连接T载体的问题已经有14人回复
T载体连接不上去已经有26人回复
载体为什么连不上呢已经有6人回复
关于目的基因不同向连接到T载体上的问题已经有19人回复
全式金的表达载体pEASY-E2表达蛋白失败已经有6人回复
T载体连接温度和时间已经有7人回复
pGM-T载体连接条件已经有8人回复
长片段连接问题已经有12人回复
表达载体的链接已经有16人回复
T载体连接问题已经有3人回复
表达载体连接好后测序问题已经有17人回复
构建pBI121表达载体，目的基因与载体连接不上已经有54人回复
目的片段与表达载体的连接已经有23人回复
表达载体的构建已经有17人回复
双酶切连接表达载体，两个月都没做出来，问题到底出在哪里呢~？求指点已经有52人回复
【求助/交流】关于T载体连接问题已经有22人回复
【求助/交流】表达载体构建不成功的原因已经有27人回复
【求助/交流】连接表达载体PET-28A失败原因已经有23人回复
【求助/交流】酿酒酵母真核表达载体构建和连接的问题已经有6人回复

1楼 2013-11-16 10:05:44

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

MolEPI: 10
应助: 1662 (讲师)
金币: 8693.8
红花: 72
帖子: 3516
在线: 456小时
虫号: 1614001
注册: 2012-02-13
专业: 生物化学

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-11-16 17:59:47
LWL8798: 金币+5, ★有帮助 2013-11-20 08:33:21

一般都是酶切没做好。严格根据DNA的量使用酶，并做单酶切对照。酶切完全后立即失活回收。

2楼2013-11-16 17:48:11

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

相关版块跳转我要订阅楼主 LWL8798 的主题更新