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寥寥半夏

金虫 (著名写手)

望着前方,走错了方向

[求助] 做PCR过程中提取RNA时有黑色沉淀

用小鼠心肌细胞做PCR提取RNA时,在加入氯仿相分离步骤时,上层水相在加入异丙醇离心后出现黑色沉淀,附着在管壁,洗涤时很难把它飘上来,再溶解时也很难溶解,出现黑色产物的EP管在测RNA纯度时,OD260/280约为1.0左右,浓度很高,都达到60+ug/ml,这个沉淀是什么东西?蛋白质污染?DNA污染?RNA降解产物?多糖?心肌纤维?
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liu2883508

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
寥寥半夏: 金币+10, 有帮助, 可是有一个小EP管里就是白色沉淀,那个测出来的RNA纯度就是好的 2013-11-12 11:56:37
黑色沉淀不是RNA,RNA是无色的,跟DNA一样,楼主溶解不掉黑色的东西,就应该离心取上清液来获取RNA,把沉淀去掉就行~这个沉淀肯定会影响你的OD值的~
人生就是要不断的前进,忘掉不好的,记住好的向前行
2楼2013-11-12 11:17:44
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