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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 做PCR过程中提取RNA时有黑色沉淀
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寥寥半夏

金虫 (著名写手)

望着前方，走错了方向

[求助] 做PCR过程中提取RNA时有黑色沉淀

用小鼠心肌细胞做PCR提取RNA时，在加入氯仿相分离步骤时，上层水相在加入异丙醇离心后出现黑色沉淀，附着在管壁，洗涤时很难把它飘上来，再溶解时也很难溶解，出现黑色产物的EP管在测RNA纯度时，OD260/280约为1.0左右，浓度很高，都达到60+ug/ml，这个沉淀是什么东西？蛋白质污染？DNA污染？RNA降解产物？多糖？心肌纤维？
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流光容易把人抛，红了樱桃，绿了芭蕉。
1楼 2013-11-11 20:57:10
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liu2883508

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
寥寥半夏: 金币+10, ★有帮助, 可是有一个小EP管里就是白色沉淀，那个测出来的RNA纯度就是好的 2013-11-12 11:56:37
黑色沉淀不是RNA，RNA是无色的，跟DNA一样，楼主溶解不掉黑色的东西，就应该离心取上清液来获取RNA，把沉淀去掉就行~这个沉淀肯定会影响你的OD值的~
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人生就是要不断的前进，忘掉不好的，记住好的向前行
2楼2013-11-12 11:17:44
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