24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 2469  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

廿四

铁虫 (小有名气)

[求助] 如何通过设计引物,插入三个新的DNA碱基

各位虫友好,现有一实验技术上的问题,欢迎大家多多解惑:

在下的序列如下,

T ATG GGC GCG GGG CCG GGC......
(前四个碱基为NdeI 酶切位点,同时atg为翻译起始位点,对应氨基酸序列为M G A G P G......)

现希望在M 和 G 之间插入一个C,即半胱氨酸(DNA序列为 TGT)。

请问我的正向引物这样设计可行么:

CATATGTGTGGCGCGGGGCCGGG

注:以上碱基序列均为5’到3’。
谢谢大家!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bolysu

禁虫 (著名写手)


感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励交流! 2013-11-09 14:03:17
本帖内容被屏蔽

4楼2013-11-09 10:34:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

yb19841014

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-11-09 02:15:35
我觉得可以啊  在看看退火温度吧 好像GC含量比较高啊
2楼2013-11-08 21:48:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

廿四

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yb19841014 at 2013-11-08 21:48:43
我觉得可以啊  在看看退火温度吧 好像GC含量比较高啊

是啊 退火温度78.9, premier预测的,实际可能略低。。。GC含量实在没办法,本身序列在那里放着,只能加DMSO试试了。。。谢谢你!
3楼2013-11-08 21:59:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bingdong05

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以的,引物设计稍长点,即插入点后面的序列设计20-30个碱基,应该可以,楼主注意的是退火温度以及GC含量,这个影响还是蛮大的
5楼2013-11-09 16:10:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[找工作] 山东高校教师考核超级无底线,员工过不下去啦 +3 qut2026 2026-04-09 4/200 2026-04-10 17:38 by doublecle
[考研] 材料与化工调剂 +9 否极泰来2026 2026-04-10 10/500 2026-04-10 17:34 by laoshidan
[考研] 337求调剂 +3 研s. 2026-04-10 3/150 2026-04-10 16:20 by 木子君1218
[考研] 286求调剂 +7 草木不言 2026-04-04 7/350 2026-04-10 16:15 by 柴小白
[考研] 285求调剂 +9 AZMK 2026-04-07 11/550 2026-04-10 15:24 by AZMK
[考研] 一志愿西交机械专硕求调剂 +8 求上岸的小王 2026-04-10 8/400 2026-04-10 15:09 by hemengdong
[考研] 机械还有还有名额吗?太难了 +6 笑笑袁 2026-04-10 6/300 2026-04-10 11:54 by 高维春
[考研] 一志愿华南理工大学331分材料求调剂 +5 天下ww 2026-04-09 5/250 2026-04-10 08:36 by 5268321
[考研] 一志愿085404,总分291,四级已过,求调剂 +10 阿俊阿俊阿俊 2026-04-04 12/600 2026-04-09 16:18 by lin-da
[考研] 085600,321分求调剂 +19 大馋小子 2026-04-04 20/1000 2026-04-09 14:12 by Delta2012
[考研] 265求调剂 +4 风说她早忘了 2026-04-07 4/200 2026-04-09 13:59 by only周
[考研] 一志愿985初试354分生物调剂 +3 031001 2026-04-06 3/150 2026-04-09 00:30 by Evan_Liu
[考研] 材料考研求调剂总分280 +30 mkjlz1 2026-04-06 35/1750 2026-04-08 21:25 by cyh—315
[考研] 085600,320分求调剂 +16 大馋小子 2026-04-04 17/850 2026-04-06 07:58 by MOF_Catal
[考研] 一志愿C9的化学工程(085602) 340分,感觉校内调剂无望,求调剂 +12 万事宜臻 2026-04-04 12/600 2026-04-06 07:46 by 无际的草原
[考研] 085500机械专硕初试288求调剂 +3 GZJguo666- 2026-04-05 3/150 2026-04-05 18:06 by jkddd
[考研] 数一英一274机械调剂 +5 星陨流霞 2026-04-04 6/300 2026-04-05 11:38 by arrow8852
[考研] 材料调剂 +7 dxy调剂 2026-04-04 7/350 2026-04-05 09:15 by 陌秋26
[考研] 男生,一志愿沪9生物学071000,初试308求调剂 +3 刘墨墨 2026-04-04 3/150 2026-04-05 08:26 by barlinike
[考研] 调剂 +8 熊二想上岸 2026-04-04 8/400 2026-04-05 05:27 by houyaoxu
信息提示
请填处理意见