版块导航: 正在加载中...

客户端APP下载

登录注册

应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

廿四

铁虫 (小有名气)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 11.2
散金: 540
帖子: 176
在线: 70.4小时
虫号: 716573
注册: 2009-03-06
专业: 生物技术药物

[求助] 如何通过设计引物，插入三个新的DNA碱基

各位虫友好，现有一实验技术上的问题，欢迎大家多多解惑：

在下的序列如下，

T ATG GGC GCG GGG CCG GGC......
（前四个碱基为NdeI 酶切位点，同时atg为翻译起始位点，对应氨基酸序列为M G A G P G......）

现希望在M 和 G 之间插入一个C，即半胱氨酸（DNA序列为 TGT）。

请问我的正向引物这样设计可行么：

CATATGTGTGGCGCGGGGCCGGG

注：以上碱基序列均为5’到3’。
谢谢大家！

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

引物与模板不完全配对的结果已经有3人回复
人类基因组DNA引物设计问题已经有7人回复
克隆基因可以用起始位点上游或终止位点后面的碱基设计引物吗？已经有3人回复
求助设计引物时酶切位点保护碱基的问题已经有19人回复
单个碱基突变的PCR条件如何优化已经有11人回复
上游引物和下游引物的碱基数目要一样多么？已经有5人回复
怎么样将一堆碱基序列分成10个一组？已经有15人回复
设计了3条引物，请大家帮我看看是否可用，两个哪个好一些呢？谢谢了！已经有12人回复
小女纸最近准备做RACE，要P中间序列，求大神帮忙设计简并引物~~~！已经有10人回复
【求助】急~~测序发现在引物位置发现一个碱基缺失已经有15人回复
如果引物中间有3个碱基不配对的，还可以扩出来吗已经有5人回复
求助碱基互补配对原则问题已经有11人回复
引物设计3‘端最后一个碱基的讨论已经有13人回复
重组质粒丢失一个碱基是否影响表达已经有13人回复
求助：已知引物的碱基序列，如何计算引物的长度？已经有11人回复
NcoⅠ酶切位点的设计问题已经有5人回复
测序结果发现，在引物位置多了一位碱基，是什么原因引起的？已经有16人回复
关于PCR引物设计及添加酶切位点和保护碱基的问题已经有4人回复
设计的引物错了一个碱基对后续试验影响大吗？已经有6人回复
设计引物时酶切位点保护碱基的问题已经有8人回复

1楼 2013-11-08 20:45:14

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

bingdong05

银虫 (正式写手)

应助: 15 (小学生)
金币: 173.6
散金: 174
帖子: 559
在线: 158.8小时
虫号: 281641
注册: 2006-09-23
性别: GG
专业: 微生物生理与生物化学

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

可以的，引物设计稍长点，即插入点后面的序列设计20-30个碱基，应该可以，楼主注意的是退火温度以及GC含量，这个影响还是蛮大的

5楼2013-11-09 16:10:41

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

相关版块跳转我要订阅楼主廿四的主题更新