24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 2472  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

廿四

铁虫 (小有名气)

[求助] 如何通过设计引物,插入三个新的DNA碱基

各位虫友好,现有一实验技术上的问题,欢迎大家多多解惑:

在下的序列如下,

T ATG GGC GCG GGG CCG GGC......
(前四个碱基为NdeI 酶切位点,同时atg为翻译起始位点,对应氨基酸序列为M G A G P G......)

现希望在M 和 G 之间插入一个C,即半胱氨酸(DNA序列为 TGT)。

请问我的正向引物这样设计可行么:

CATATGTGTGGCGCGGGGCCGGG

注:以上碱基序列均为5’到3’。
谢谢大家!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

廿四

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yb19841014 at 2013-11-08 21:48:43
我觉得可以啊  在看看退火温度吧 好像GC含量比较高啊

是啊 退火温度78.9, premier预测的,实际可能略低。。。GC含量实在没办法,本身序列在那里放着,只能加DMSO试试了。。。谢谢你!
3楼2013-11-08 21:59:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

yb19841014

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-11-09 02:15:35
我觉得可以啊  在看看退火温度吧 好像GC含量比较高啊
2楼2013-11-08 21:48:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bolysu

禁虫 (著名写手)


感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励交流! 2013-11-09 14:03:17
本帖内容被屏蔽

4楼2013-11-09 10:34:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bingdong05

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以的,引物设计稍长点,即插入点后面的序列设计20-30个碱基,应该可以,楼主注意的是退火温度以及GC含量,这个影响还是蛮大的
5楼2013-11-09 16:10:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 303求调剂 +5 SereinQ 2026-04-10 6/300 2026-04-10 18:42 by chemisry
[考研] 材料与化工调剂 +10 否极泰来2026 2026-04-10 11/550 2026-04-10 17:55 by hmn_wj
[考研] 266求调剂 +29 阳阳哇塞 2026-04-07 29/1450 2026-04-10 16:20 by 高维春
[考研] 机械专368 有去处吗 +4 种大树 2026-04-10 4/200 2026-04-10 15:31 by jiajinhpu
[考研] 一志愿中南大学物理学,英一66,求调剂 +4 长烟旖旎 2026-04-08 5/250 2026-04-10 10:31 by 颖果儿
[考研] 还有化工二轮调剂的学校吗 5+11 化工人999 2026-04-09 42/2100 2026-04-10 09:42 by 690616278
[考研] 生物与医药调剂 +5 十七sa 2026-04-05 5/250 2026-04-10 08:14 by kangsm
[考研] 070300化学学硕311分求调剂 +18 梁富贵险中求 2026-04-04 20/1000 2026-04-09 11:18 by 哒哒哒呱呱呱
[考研] 070300化学279求调剂 +17 哈哈哈^_^ 2026-04-08 18/900 2026-04-09 10:49 by 三七七想上岸
[考研] 353求调剂 +8 晴空万里air 2026-04-07 8/400 2026-04-09 00:18 by GouQ
[考研] 一志愿211,0703化学305分求调剂 +20 严西西戏 2026-04-06 26/1300 2026-04-08 22:12 by 凯凯要变帅
[考研] 一志愿郑州大学085600求调剂 +21 吃的不少 2026-04-05 24/1200 2026-04-08 16:47 by sunhuadong
[考研] 326分,一志愿沪9,求生物学调剂 +4 刘墨墨 2026-04-05 4/200 2026-04-08 06:22 by lijunpoly
[考研] 生物医药调剂|SCI中科院三区一作+多项科研成果 +8 likangxing 2026-04-07 11/550 2026-04-08 00:02 by lys0704
[考研] 11408 325分 +3 jgtxuxgkx 2026-04-07 3/150 2026-04-07 23:10 by lbsjt
[考研] 材料调剂 +11 一样YWY 2026-04-07 11/550 2026-04-07 15:13 by shdgaomin
[考研] 材料调剂 +5 小刘同学吖吖 2026-04-06 5/250 2026-04-06 18:34 by sherry_1901
[考研] 一志愿安徽某211 0703化学总分339求调剂 +7 晚风不晚 2026-04-04 7/350 2026-04-06 14:06 by houyaoxu
[考研] 材料调剂 +7 dxy调剂 2026-04-04 7/350 2026-04-05 09:15 by 陌秋26
[考研] 一志愿东北大学085901土木专硕345求调剂 +3 zxt11111 2026-04-04 3/150 2026-04-04 14:21 by 土木硕士招生
信息提示
请填处理意见