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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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vpz2007

木虫 (小有名气)

[求助] His-tag蛋白纯化柱子洗脱液中除去咪唑的办法

请问蛋白溶解在250mM咪唑、50mM磷酸二氢钠、300mM氯化钠中的蛋白洗脱液怎样才能除盐将蛋白改溶解在PBS中呢?
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可以接受失败,但不能失去再次站起来的勇气
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vpz2007

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wangpeng227 at 2013-11-08 16:30:15
可以试试超滤,比透析快

请问超滤的话咪唑和其他无机盐都是等体积滤出吗?那最后咪唑浓度也没有降低啊
可以接受失败,但不能失去再次站起来的勇气
5楼2013-11-08 19:28:16
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
vpz2007: 金币+2, 有帮助 2013-11-08 19:25:24
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-11-08 19:25:56
vpz2007: 金币+2, ★★★★★最佳答案 2013-11-09 00:16:48
(1)透析
(2)浓缩样品后上分子筛柱,然后用你想要的溶液洗脱
行至水穷处,坐看云起时
2楼2013-11-08 16:27:13
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wangpeng227

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励交流! 2013-11-08 19:26:02
vpz2007: 金币+1, 有帮助 2013-11-08 19:28:41
可以试试超滤,比透析快
3楼2013-11-08 16:30:15
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vpz2007

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by pennchem at 2013-11-08 16:27:13
(1)透析
(2)浓缩样品后上分子筛柱,然后用你想要的溶液洗脱

透析的话用什么缓冲液透析呢?透析袋浸泡在哪里?我以前用PBS透析有蛋白在透析袋里面析出,好像是咪唑从透析袋出去之后PH变酸了。分子筛柱的话不是应该大蛋白先出来吗?是除盐啊,怎么换缓冲液呢?
可以接受失败,但不能失去再次站起来的勇气
4楼2013-11-08 19:25:12
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